胡冰洁
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：辽宁大学生命科学院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：理学医药卫生更多>>
- 天然氮末端重组cC可溶性分泌表达被引量：1
- 2008年
- 目的构建具有天然氮末端的重组鸡半胱氨酸蛋白酶抑制剂(chicken cystatin,cC)在毕赤酵母中高效分泌表达。方法通过设计独特的引物,利用DNA重组技术将cC的cDNA片段插入分泌型酵母表达载体pPICZαA中,构建相应的重组酵母表达质粒pPICZαA-cC,并在巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株X-33中甲醇诱导表达。结果经十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、底物活性SDS-PAGE和Native-PAGE分析,随着不同剂量的β-巯基乙醇和盐酸胍组合处理重组cC,二硫键被破坏的程度加深,5 mol/L盐酸胍与10%β-巯基乙醇的组合几乎完全打开了分子内的二硫键。结论92.9%的重组cC具有二硫键并与天然cC具有相似的木瓜蛋白酶抑制活性。
- 张慧丽杨松何金萍胡冰洁曲方宋有涛
- 关键词：毕赤酵母二硫键
- 用分子动力学方法对Cystatin蛋白的研究被引量：2
- 2008年
- 通过动力学模拟研究野生型和I66Q突变型cC的动力学特性,为设计和筛选治疗Cystatin C引起的脑淀粉样血管病药物提供重要的理论依据。通过分子动力学模拟的方法,选择可引起脑淀粉样血管病的Cystatin蛋白为模型,探讨了在形成致病状纤维过程中起到关键作用的蛋白质结构位点。研究分子动力学模拟显示,突变型cC较野生型更易形成淀粉样纤维,突变型蛋白的L1部位较野生型具有更高的柔性,更易通过结构域交换形成二聚体进而引发淀粉样纤维沉淀。该研究结果对于设计治疗相关疾病如疯牛病等的药物也有一定的借鉴意义。
- 张慧丽刘元于媛媛胡冰洁宋有涛
- 关键词：分子动力学模拟脑淀粉样血管病
