赵岩
- 作品数：3 被引量：16H指数：3
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 增强磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性对谷氨酸棒状杆菌积累α-酮戊二酸的影响被引量：4
- 2016年
- 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶是谷氨酸棒杆菌中催化合成TCA循环中重要代谢物草酰乙酸的关键酶,本文以谷氨酸棒状杆菌GDK-10为出发菌株,通过同源重组技术对磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶编码基因pepc进行以下改造:将GDK-10的Ppepc启动子替换为强启动子Ptuf,获得菌株GDK-11;构建pepc双拷贝菌株GDK-12;对GDK-10基因组pepc进行定点突变(N917G),获得菌株GDK-13。实时荧光定量PCR检测表明,菌株GDK-11和GDK-12的pepc表达量是GDK-10的47.05倍和2.03倍。发酵结果表明,菌株GDK-11和GDK-12的产酸量相对于出发菌株分别下降45.50%和13.90%,但GDK-12的单位菌体产量较GDK-10提高38.59%。菌株GDK-13产酸量无明显变化,但其单位菌体产量和糖酸转化率分别提高21.14%和8.97%。可见,适量过量表达pepc和将GDK-10基因组pepc替换为解除天冬氨酸反馈抑制的pepc(N917G)均可提高α-KG的单位菌体产量且后者可显著提高糖酸转化率。本研究结果可对α-KG的基因工程改造奠定基础。
- 孙兰超刘涛赵岩谢希贤徐庆阳张成林陈宁
- 关键词：谷氨酸棒状杆菌Α-酮戊二酸磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶同源重组
- 谷氨酸棒杆菌代谢副产物对α-酮戊二酸积累的影响被引量：3
- 2016年
- 谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)中ldh基因编码乳酸脱氢酶,可以催化丙酮酸转化生成乳酸,ack A和pqo基因编码乙酸激酶和丙酮酸:醌氧化还原酶,可以催化丙酮酸转化为乙酸。为了研究这三个基因缺失对谷氨酸棒杆菌α-酮戊二酸积累的影响,以C.glutamicum GDK-10为出发菌株,通过重叠延伸PCR及同源重组技术分别构建ldh,pqo,ack A,pqo和ack A基因缺失突变株GDK-14,GDK-15,GDK-16,GDK-17。对出发菌及上述重组菌株进行发酵验证比较,发酵结果表明:ldh和pqo基因缺失菌株的α-酮戊二酸产量分别比出发菌降低了8.54%和27.9%,而ack A基因的缺失使α-酮戊二酸产量比出发菌提高了8.99%。
- 赵岩黄龙辉李娟孙兰超李燕军谢希贤陈宁
- 关键词：谷氨酸棒杆菌基因缺失Α-酮戊二酸乳酸乙酸
- 微生物同步利用葡萄糖和木糖代谢工程概述被引量：11
- 2017年
- 现阶段,随着资源枯竭和环境污染问题的日益突出,利用农业废弃物等木质纤维素原料发酵生产生物产品、生物能源和生物材料已经成为学术界和社会的共识.微生物同步利用葡萄糖和木糖是木质纤维素生物炼制的重要内容,同时也有利于提高芳香族氨基酸等产品的发酵性能.然而,由于碳分解代谢物阻遏(葡萄糖效应)的存在,大多数微生物并不具备这种特性,迫切需要采用代谢工程手段构建高效同步利用葡萄糖和木糖的菌株.首先对微生物同步利用葡萄糖和木糖的意义进行了说明,然后阐述了氨基酸和核苷生产菌大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和谷氨酸棒杆菌葡萄糖效应的分子机制和破除策略,同时介绍了一些能够同步代谢葡萄糖和木糖的工程菌株的实际应用.
- 李燕军赵岩黄龙辉李娟谢希贤陈宁
- 关键词：木糖氨基酸大肠杆菌枯草芽孢杆菌谷氨酸棒杆菌
