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艰难梭菌谷氨酸脱氢酶的原核表达及其胶体金免疫层析检测方法的建立被引量：3: 2019年; 目的原核表达艰难梭菌(Clostridium difficile,CD)谷氨酸脱氢酶(glutamate dehydrogenase,GDH),并建立GDH胶体金免疫层析检测方法。方法以艰难梭菌(ATCC BAA-1382)全基因组为模板,PCR法扩增GDH基因,并克隆至载体pET-30a(+),将重组质粒转染至E. coli BL21(DE3),诱导表达重组GDH,并优化IPTG终浓度(0、0. 2、0. 4、0. 6、0. 8、1. 0 mmol/L)、诱导时间(0、2、4、6 h)及诱导温度(31、34、37℃),表达产物采用Ni-NTA purificationSystem进行纯化。用纯化蛋白免疫家兔,以获得的多克隆抗体作为金标抗体,制备胶体金试纸条,并验证其灵敏性、特异性、精密性及稳定性。结果经双酶切及测序鉴定,重组质粒p ET-30a-GDH构建正确。最适诱导表达条件为:于37℃,IPTG终浓度为0. 8 mmol/L诱导4 h。获得的免疫血清效价达1∶51 200,制备的胶体金试纸条灵敏性为60 ng/mL,与其他肠道菌无交叉反应,批内、批间结果无差异,且具有良好的稳定性。结论原核表达了重组GDH,成功建立了GDH胶体金试纸条检测方法,且灵敏性、特异性、精密性及稳定性均良好,具有临床应用价值。; 任永鑫孙斌徐广贤; 关键词：艰难梭菌谷氨酸脱氢酶原核表达胶体金试纸条

北方规模化猪场周围环境空气中PM10的监测分析被引量：4: 2015年; 为了检测龙江省东部地区某规模化猪场周围环境空气中PM10日均浓度,以分析猪场产生的PM10对周围环境和人畜健康的影响。采样标准,按HJ/T194的要求执行。采样后,测量采样器中采样前后滤膜重量差,根据公式计算PM10的重量和浓度。结果经过7 d连续采集样品的测定,最终获得数据为PM10浓度范围在0.065 mg/m^3至0.085 mg/m^3之间,日均0.076 mg/m^3,猪场四周的PM10浓度值每天均高于国家标准,总体增加范围在1倍以内,最高可以达到标准值的1.7倍。; 王卫红刘双红任永鑫孙斌; 关键词：猪场悬浮颗粒物 PM10

鹿结核自然病例结核分枝杆菌复合物的鉴定与分型: 2018年; 对收集的5例鹿结核自然病例进行结核分枝杆菌复合物分子生物学鉴定和基因分型,探索结核分枝杆菌传播过程中人与其他动物间的关系。从而掌握结核病的传播规律,并为动物结核病的防控提供临床数据。试验中以常规病理组织学方法制作切片观察病灶组织学变化,应用Oligo(7.0)设计特异性引物,以IS6110插入序列设计引物进行结核分枝杆菌复合物的鉴定。采用单管多重PCR方法,对所分离的结核分枝杆菌复合物PCR鉴定阳性菌株,进行牛分枝杆菌和结核分枝杆菌菌种鉴定。结果所采集的鹿结核自然病例中人型结核分枝杆菌2例,牛型结核分枝杆菌3例。表明结核病在人与其他动物间相互传染,并且,人传染鹿的可能性更大。; 任永鑫王卫红孙斌; 关键词：结核分枝杆菌 IS6110

肝脏纤维化复合模型的改良及病理组织学评价被引量：3: 2018年; 为了建立完善、快速、高效肝脏纤维化动物模型,试验采用乙醇灌胃、高脂饲料喂养、高糖饮水等复合因素,并结合腹腔注射CCl4建立大鼠肝脏纤维化模型,并对肝脏纤维化形成病变和相关指标进行评价。结果表明:复合因素的改良能够促进大鼠肝脏纤维化的形成,造模8周大鼠肝脏细胞变性坏死,汇管区和肝小叶间纤维组织增生,可见胶原纤维沉积,形成典型肝脏纤维化的假小叶病变;大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、伽马谷氨酰胺转肽酶、白蛋白、总蛋白、胆固醇水平与对照组比较差异显著;与纤维化形成密切相关的转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白表达均呈阳性反应。说明试验建立的肝脏纤维化改良方法成功率高,形成时间短,模型稳定。; 刘秋瑾原冬伟王晓雅张佳韧刘宏睿范文禄任永鑫; 关键词：肝脏纤维化病理组织学免疫组织化学

北方规模化猪场周环境空气中NH_3的监测分析被引量：1: 2017年; 为了检测北方寒区猪场生产过程中向周围环境中NH_3的排放,以研究NH_3排放量引起的环境问题及对猪疾病发生的影响。按照《环境空气和废气氨的测定纳氏试剂分光光度法》(HJ533-2009)[1]所述方法进行采样的检测分析。结果经过样品的测定,NH_3浓度为日均0.182 mg/m^3,与国标GB/T17824.3-2008中规定环境中日均氨气含量上限0.08 mg/m3相比较,高出2.275倍。该结果说明该猪场所产生NH_3对猪场及周围环境造成严重的污染。; 武志敏郑炜任永鑫刘双红孙斌; 关键词：猪场氨气

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任永鑫