刘春云
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 供职机构：皖西学院生物与制药工程学院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 侵染浙贝母的百合斑驳病毒CP基因的原核表达及抗血清制备被引量：4
- 2011年
- 目的:制备抗百合斑驳病毒(Lily mottle virus,LMoV)CP血清,为研究侵染不同植物LMoV之间的血清学关系以及大田检测LMoV奠定基础。方法:根据Genbank报道的百合斑驳病毒CP基因序列设计引物,扩增其外壳蛋白基因并分析序列。将LMoV CP基因插入表达载体pSBET,转化大肠杆菌BL21(DE3)Plys E菌株,通过IPTG诱导表达。经12%SDS-PAGE和5%～20%梯度SDS-PAGE两次纯化CP,免疫小鼠获得抗CP血清,采用Western blot分析抗体的特异性,采用ELISA分析抗体能否与天然LMoV病毒结合。结果:LMoV的CP与目前已报道的LMoV不同分离物CP基因核苷酸序列同源性为95%～99%,氨基酸序列同源性为98%～100%。制备的抗体对CP具有高度特异性,且能够与天然LMoV病毒离子结合。结论:本研究制备的抗血清可以作为百合斑驳病毒的检测。
- 韦传宝姚厚军杨宇刘春云
- 关键词：浙贝母百合斑驳病毒CP基因原核表达抗血清制备
- 大蒜A病毒CP基因的原核表达及抗血清制备被引量：1
- 2011年
- 根据GenBank报道的大蒜A病毒(GarV-A)序列设计引物、扩增其外壳蛋白基因并进行序列分析。结果表明,GarV-A的CP基因与目前已报道的两种GarV-A不同分离物CP基因的核苷酸序列同源性为98%-99%;氨基酸序列同源性均为98%。将GarV-A CP基因插入表达载体pSBET,在大肠杆菌BL21(DE3)Plys E菌株中诱导表达。CP经12%SDS-PAGE和5%-20%SDS-PAGE两次纯化,免疫小鼠获得抗CP血清,Western blotting分析表明确定制备的抗体对CP具有高度特异性,ELISA检测表明制备的抗体能够与天然病毒离子结合,因此可以作为该病毒的检测。
- 杨宇韦传宝华俊雅刘春云吴琪瑶
- 关键词：CP基因原核表达抗血清制备
