孔德昭
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 供职机构：江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 双抗体夹心酶联免疫方法检测丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌被引量：2
- 2016年
- 丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌可以引起十字花科细菌性黑斑病,是侵染萝卜、白菜、花椰菜等农作物的重要病害之一。以灭活的丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌(NCPPB1820)为免疫原免疫小鼠,通过杂交瘤细胞技术,筛选最终获得6株产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞。将辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)与抗体偶联,作为检测探针,分别将6种单克隆抗体作为包被抗体,进行两两配对筛选。结果表明,所制备的抗体特异性较好,对水稻细菌性谷枯病菌、水稻细菌性条斑病菌、玉米细菌性枯萎病菌、丁香假单胞菌丁香致病变种均没有交叉反应。以6号抗体作为检测抗体(6-HRP),以1号抗体作为包被抗体,建立酶联免疫分析法获得了最佳的敏感度。检测丁香假单胞杆菌斑点致病变种的最低检测限为1.5×105cfu/m L,定量限为4.12×105cfu/m L。基于双抗体夹心的酶免疫方法特异性好,便捷,可以实现对丁香假单胞杆菌斑点致病变种病菌高通量测定。
- 王文彬孔德昭唐丽娟马伟匡华
- 关键词：酶联免疫测定单克隆抗体
- 西瓜花叶病毒三抗体夹心法与纸质免疫检测传感器检测方法的建立被引量：2
- 2015年
- 利用西瓜花叶病毒2号外壳蛋白的小鼠单克隆抗体与兔多克隆抗体,建立两种针对西瓜花叶病毒2号的检测方法。运用现有的抗体建立了三抗体夹心酶联免疫吸附法(TAS-ELISA);运用碳纳米管与抗体包裹滤纸制备纸质免疫检测传感器,再基于电化学工作站建立电化学纸质免疫检测传感器检测方法。两种方法对实际样品检测限分别为0.15、0.20μg/m L,检测时间分别为3 h和30 min。根据结果分析比较,三抗体夹心法具有较高的检测灵敏度,而电化学纸质免疫传感器检测方法具有更短的检测时间。
- 孔德昭朱怡橙马伟徐丽广胥传来
- 关键词：西瓜花叶病毒2号外壳蛋白
- 基于酶联免疫反应的玉米细菌性枯萎病菌快速检测方法被引量：2
- 2016年
- 通过菌体免疫小鼠获得高灵敏的高特异性单克隆抗体，并以此为基础建立一种快速、灵敏的单克隆抗体双抗体夹心法检测玉米细菌性枯萎病菌（Pantoea stewartill subsp.Stewartii）。通过小鼠脾脏融合实验获得3株单克隆抗体（12B4、10B1、11C2），并通过双抗体夹心法筛选配对细胞株，建立双抗体夹心法。最低检测限（LOD）为1.5×10^4 cfu/mL，线性范围在4.57×10^5-1.11×10^8 cfu/mL。该方法对玉米细菌性枯萎病菌具有很好的特异性，对玉米种子添加回收实验回收率为85.6%-90.2%，相对标准偏差低于5.0%。
- 孔德昭彭娟刘丽强唐丽娟匡华
- 关键词：玉米细菌性枯萎病菌单克隆抗体双抗体夹心法玉米
