孙欢欢
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
- 供职机构：山西医科大学药学院更多>>
- 发文基金：山西省回国留学人员科研经费资助项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于二代测序技术的黄芪萜类合成酶基因挖掘与生物信息学分析被引量：5
- 2018年
- 目的:对黄芪萜类合成酶(TPS)基因进行挖掘与生物信息学分析,为黄芪萜类化合物特别是三萜皂苷的合成、积累作用及其分子机制研究奠定基础。方法:通过二代测序技术构建黄芪转录组文库,根据基因注释信息进行TPS序列初步筛选,BLAST同源比对确认。运用MEGA 4. 0构建邻接(NJ)系统进化树,采用在线工具开放阅读框(ORF) Finder,Compute p I/Mw,Prot Comp 9. 0进行生物信息学分析。结果:共获得76条TPS序列,其中13条拥有完整的ORF。获得的TPS序列中注释为TPS10序列最多,其次为大根香叶烯D合成酶和单萜合成酶;选取17条代表性TPS序列进行同源性分析,发现黄芪TPS序列分为3个类群,每一类群均包括Ⅰ型和Ⅱ型萜类合成酶序列。此外,挖掘得3条环阿屯醇合酶(CAS)序列,其中原始编号为CL6827. Contig1和Unigene19112的CAS序列具有完整的ORF,所编码蛋白质序列长度分别为795,757个氨基酸,亚细胞定位于内质网,与已报道黄芪CAS序列同源性最高。结论:利用黄芪转录组文库成功挖掘得黄芪单萜、倍半萜及三萜合成环化酶基因,定位于内质网的CAS序列与三萜皂苷主要由细胞质中的甲羟戊酸途径合成特征吻合。
- 孙欢欢高红孙海峰高建平白云娥
- 关键词：基因挖掘生物信息学开放阅读框
- 不同产地椒目药材的质量评价被引量：2
- 2017年
- 目的综合比较10批不同产地椒目药材的质量,为建立椒目质量评价体系提供依据。方法建立椒目中α-亚麻酸的气相色谱(GC)测定方法,同时参照2015版《中国药典》第四部通则的相关方法,测定水分、灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物、脂肪油的含量,采用聚类分析和t检验对10批不同产地椒目药材进行质量评价。结果椒目中水分含量为9.66%-11.55%,灰分含量为5.13%-6.51%,酸不溶性灰分含量为0.11%-0.56%;以干燥品计,椒目浸出物含量为16.77%-24.80%,脂肪油含量为19.82%-28.08%,α-亚麻酸含量为4.06%-6.56%。聚类分析显示,河南林州、广西、山西芮城4地及山西盂县的样品聚为一类;成都及安徽购买的2批样品聚为一类。两类样品在含水量、灰分、酸不溶性灰及α-亚麻酸含量方面没有显著性差异,在浸出物及脂肪油含量方面有显著性差异,河南林州、广西、山西芮城4地及盂县的椒目样品的浸出物及脂肪油含量较高。结论本次建立的GC测定方法可用于椒目α-亚麻酸的含量测定;椒目多指标的聚类分析结果,可为合理评价椒目药材的质量提供一定的依据。
- 王少苹孙欢欢张沙沙高建平仇丽霞白云娥
- 关键词：椒目聚类分析气相色谱法
- 碱处理在微量黄芪药材质控指标成分含量测定中的应用研究被引量：7
- 2018年
- 目的:建立碱处理微量黄芪药材测定黄芪皂苷Ⅳ、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花苷含量的方法,表征碱处理提高上述指标成分收率的有关物质转化特征。方法:取传统采收期黄芪根0.15 g,按1∶30的比例加入70%乙醇(内含不同浓度的氨水),超声提取,进行碱处理体系的优化。利用UPLC-QTRAP-MS多反应离子监测模式,采用BEH C18(2.1mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速:0.2 mL·min-1,柱温:30℃,测定黄芪皂苷IV含量;采用2015年版《中华人民共和国药典》黄芪含量测定项下毛蕊异黄酮葡萄糖苷色谱条件,HPLC法测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花苷含量;UPLC-Q-TOF-MS法进行有关化合物的指认。结果:用含4%氨水的70%乙醇提取时,三质控指标成分收率最高,对应的检测线性范围分别为10.70~85.60μg·mL-1、1.039~72.73μg·mL-1和1.051~73.57μg·mL-1。该优化体系中,黄芪皂苷Ⅰ、酰基化毛蕊异黄酮葡萄糖苷和酰基化芒柄花苷转化较为完全,黄芪皂苷Ⅱ部分转化;此外,还存在一未知化合物向黄芪皂苷Ⅳ的明显转化。采用该优化体系分析发现,根施外源正己醛组黄芪药材中黄芪皂苷Ⅳ含量明显高于对照,但两异黄酮组分组间无显著差异。结论:建立了一种碱处理微量黄芪测定黄芪皂苷Ⅳ、毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花苷含量的方法,该方法显著提高了黄芪药材中3个质控指标成分的收率,可应用于微量黄芪的质量评价与品质形成研究。
- 孙欢欢孙海峰柴智白云娥高建平
- 关键词：碱处理毛蕊异黄酮葡萄糖苷
