- Bevacizumab对视网膜色素上皮细胞纤维化相关因子表达的影响被引量：7
- 2014年
- 目的观察Bevacizumab对人视网膜色素上皮细胞纤维化相关因子基因及蛋白表达的影响,探讨Bevacizumab在新生血管纤维化中的作用。方法用含终浓度0.25 g·L-1Bevacizumab的DMED/F12培养液培养ARPE-19细胞,按Bevacizumab处理的时间分为0 h、6 h、12 h、24 h和48 h共5组,0 h为对照组。不同时间点收集细胞及上清。用逆转录聚合酶链反应检测ARPE-19细胞中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、转化生长因子-β2(transforming growth factorβ2,TGF-β2)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)的mRNA相对表达量。采用ELISA检测上清中CTGF、bFGF和TGF-β2的蛋白浓度,应用免疫蛋白印迹法(Western blotting)检测MMP-2蛋白的表达。结果 Bevacizumab作用后6 h、12 h、24 h和48 h,CTGF、bFGF、TGF-β2及MMP-2的mRNA相对表达量分别为CTGF:1.694±0.160、1.994±0.221、1.733±0.057、1.397±0.075,bFGF:1.720±0.068、2.144±0.080、1.893±0.068、1.372±0.076,TGF-β2:1.356±0.070、1.737±0.515、1.576±0.098、1.439±0.050,MMP-2:1.414±0.115、1.644±0.094、1.435±0.075、1.285±0.024,与对照组相比均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ELISA结果显示Bevacizumab作用后6 h、12 h、24 h和48 h,CTGF、bFGF、TGF-β2蛋白的表达量与对照组相比均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05);对照组及各时间组蛋白浓度分别为CTGF:(31.949±0.388)ng·L-1、(48.697±0.863)ng·L-1、(56.847±0.499)ng·L-1、(51.753±1.395)ng·L-1、(43.085±1.240)ng·L-1,bFGF:(26.660±1.360)ng·L-1、(46.529±3.297)ng·L-1、(55.883±1.705)ng·L-1、(47.937±1.303)ng·L-1、(36.894±2.532)ng·L-1,TGF-β2:(26.982±2.404)ng·L-1、(35.452±1.360)ng·L-1、(46.787±0.896)ng·L-1、(43.683±1.630)ng·L-1、(38.008±1.110)ng·L-1。Western blotting结果显示,Bevacizumb处理后6 h、12 h、24 h、48 h MMP-2蛋白含量升高,组间比较差异有统计学意义(F=2620.429,P=0.000)
- 张敏储三军曾繁星徐海峰
- 关键词：BEVACIZUMAB视网膜色素上皮细胞纤维化细胞因子
