梁导艳
- 作品数：15 被引量：62H指数：4
- 供职机构：陕西省人民医院更多>>
- 发文基金：陕西省中医药管理局科研基金陕西省自然科学基金陕西省重大科技创新专项计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程理学农业科学更多>>
- 三聚氰胺单克隆抗体制备与鉴定被引量：3
- 2020年
- 目的制备高度特异的三聚氰胺单克隆抗体,经酶联免疫吸附试验鉴定并制备胶体金试剂盒。方法以牛血清白蛋白交联的三聚氰胺为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗三聚氰胺单克隆抗体,经纯化制备腹水,采用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immune sorbent assay, ELISA)对抗体进行效价测定、亚类测定、交叉鉴定和蛋白质免疫印迹试验(westernblot)特异性鉴定后制备胶体金试剂盒。结果筛选出1株抗三聚氰胺单抗,制备的三聚氰胺胶体金试剂盒敏感值能达到30μg/L。结论获得了高度特异的且能稳定分泌三聚氰胺抗体的细胞株。
- 封青李研李研李研孙晶莹
- 关键词：单克隆抗体酶联免疫吸附
- 白芍总苷对小鼠成骨细胞增殖、分化和矿化的影响被引量：8
- 2019年
- 目的研究白芍总苷(TGP)对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)增殖、分化和矿化的影响。方法采用MTT法和流式细胞术检测TGP对MC3T3-E1细胞增殖和细胞周期的影响;诱导MC3T3-E1成骨分化,通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性和RT-PCR法检测人类相关转录因子2(Runx2)基因表达,分析TGP对成骨分化的影响,采用茜素红染色分析TGP对矿化的影响。结果 3、10 μg/L TGP均能促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.05, P<0.01);10 μg/L TGP可使G1期细胞的比例减少,S+ G2期细胞的比例增加(P<0.05);与对照组比较,TGP处理组细胞的ALP活性和Runx2表达水平显著升高(P<0.05, P<0.01),且矿化结节量明显增加。结论 TGP具有促进MC3T3-E1细胞增殖和分化成熟的能力,为炎性骨质疏松的治疗策略提供了实验依据和治疗思路。
- 赵向绒王海芳刘杨霍雪萍梁导艳孙晶莹胡军武敏
- 关键词：白芍总苷成骨细胞细胞增殖成骨分化矿化
- pVAX-eNOS转染急性心肌梗死患者早期内皮祖细胞及对其活性的影响被引量：1
- 2019年
- 目的探讨利用pVAX1介导一氧化氮合酶(e NOS)基因体外转染急性心肌梗死患者(AMI)外周血早期内皮祖细胞(EPCs)的可行性。方法选择陕西省人民医院2017年12月～2018年6月因心脏病发病入院且经冠脉造影检查确诊为AMI患者30例。Ficoll密度梯度离心法分离患者空腹静脉外周血单个核细胞诱导培养至EPCs并鉴定,纯化pVAX-eNOS质粒。将EPCs分为3组,e NOS转染组:用阳离子聚合物JetPEITM体外转染eNOS基因至EPCs。转染后24 h,硝酸还原酶法检测EPCs中一氧化氮(NO)的含量,ELISA和Western blot检测EPCs分泌eNOS及血管内皮生长因子(VEGF)的能力;采用Wst-1法检测EPCs增殖情况,用Transwell小室检测各组EPCs迁移及黏附功能;空质粒转染组:只转染pVAX空质粒至EPCs中;对照组:不转染EPCs。结果成功转染pVAX-eNOS基因至AMI患者早期EPCs,转染后24 h,与空质粒转染组及对照组比较,NO含量明显升高(P <0.01),eNOS表达量明显增加(P <0.01),分泌VEGF的能力明显增强(P <0.01);EPCs增殖、迁移及黏附能力明显增加(P <0.01),空质粒转染组与对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论阳离子聚合物JetPEITM可成功介导pVAX-eNOS有效转染AMI患者早期EPCs,并有效增强EPCs增殖、迁移、黏附及分泌功能,为AMI患者进行自体EPCs移植改善心肌缺血奠定了基础。
- 黄晓燕王沙沈鑫孙晶莹董向辉靳占奎宋宝国梁导艳徐翠香
- 关键词：内皮祖细胞转染急性心肌梗死
- 抗人IgG和抗人IgM单克隆抗体的特性鉴定及应用被引量：3
- 2018年
- 目的:制备特异性高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,并应用于临床血清学检测试剂盒,为其提供优质的二抗。方法:以人Ig G和Ig M为抗原,免疫BALB/c小鼠,通过传统杂交瘤融合和筛选技术制备抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体;经体内诱生法制备腹水并纯化;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western印迹进行交叉筛选和特异性鉴定,并对筛选出的单抗进行辣根过氧化物酶(HRP)标记,再与市售的检测病原微生物抗体试剂盒中对应的HRP标记的二抗(抗人Ig G和抗人Ig M)做对比分析。结果:筛选到2株可稳定分泌抗人Ig G单抗和2株抗人Ig M单抗,经交叉反应、Western印迹及对比实验分析,证明这4株单抗效价高、特异性好,比临床试剂盒中的酶标二抗特异性强、敏感度高。结论:获得4株特异性强、敏感度高的抗人Ig G和抗人Ig M单克隆抗体,可为各种病原微生物血清学的检测提供二抗试剂,具有良好的应用价值。
- 封青郭春艳郭春艳王珍梁导艳李研
- 关键词：人IGG单克隆抗体
- 三聚氰胺偶联抗原制备及其免疫原性分析被引量：1
- 2015年
- 探讨以2-氯-4,6-二胺-1,3,5-三嗪(CAAT)作为起始物,与6-氨基己酸(ACS)连接转化得到半抗原MelACS,再将其与牛血清白蛋白(BSA)偶联形成具有连接手臂的抗原BSA-ACS-Mel,用于单克隆抗体(m Ab)制备。经过液相色谱、Western blot及ELISA等抗原特性分析,证明半抗原Mel-ACS的转化效率达到了85.9%,且针对Mel特异性单抗获得率达到了42.9%,抗原BSA-ACS-Mel免疫原性较好,完全可以适用于三聚氰胺分子的特异性检测需要。这对其余小分子抗原的合成也起到一定的指导作用。
- 赵彭花张海祥李涛王鑫宋卫刘海静谢毅霍雪萍赵向绒梁导艳李元胡军
- 关键词：三聚氰胺抗原免疫原性
- 致康胶囊对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2018年
- 目的:探讨致康胶囊对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖及凋亡的影响。方法:采用0(对照组)、0.5、1.0、2.0 mg/ml致康胶囊培养液分别处理乳腺癌细胞MCF-7,分别于培养后24、48和72 h计数MCF-7细胞数。采用MTT法检测致康胶囊对乳腺癌MCF-7细胞生长增殖的影响;采用流式细胞仪检测细胞周期;PI单染流式细胞仪检测致康胶囊对MCF-7细胞凋亡的影响。结果:不同浓度致康胶囊能有效地抑制MCF-7细胞增殖,且随浓度增加和作用时间延长,细胞的增殖抑制率增加。0.5、1.0、2.0 mg/ml的致康胶囊作用MCF-7细胞72 h后,G0/G1期细胞所占细胞周期的比例分别为19.33%±10.38%、14.12%±5.37%和26.84%±2.13%;而对照组G0/G1期比例为51.83%±1.90%。0.5、1.0、2.0 mg/ml致康胶囊处理48 h后细胞的凋亡率分别为2.09%±0.74%、3.84%±0.78%和5.35%±0.83%。结论:致康胶囊能抑制MCF-7细胞的体外增殖,且抑制作用表现为时效和量效关系;并能通过阻滞细胞周期于G2/M期,促进乳腺癌细胞凋亡。
- 程冲祝旭龙韩炜梁导艳马刚张恩李建辉侯东祥
- 关键词：乳腺癌致康胶囊细胞增殖细胞周期
- 肺炎支原体感染患儿视黄醇结合蛋白和T细胞亚群的变化及意义被引量：17
- 2018年
- 目的探讨支原体肺炎感染患儿后视黄醇结合蛋白(RBP)、T细胞亚群水平的变化,研究视黄醇结合蛋白和T细胞亚群检测对支原体肺炎感染的临床指导作用及价值。方法选取65例支原体肺炎患儿为观察组,40例健康儿童为对照组,收集两组血清及全血。观察组病例均符合儿童肺炎诊断标准。两组均检测血清RBP含量和全血淋巴细胞表面CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+百分比及CD4/CD8值。结果观察组总CD3+、CD3+CD4+细胞百分比、CD4/CD8比值显著低于对照组(P<0.01);观察组CD3+CD8+百分比显著高于对照组(P<0.01)有统计学意义;观察组RBP显著低于对照组(P<0.05)。结论 RBP和T细胞亚群在儿童感染支原体肺炎时能敏感的反映肝功能及免疫功能的变化,对临床后续治疗有较高的指导意义及价值。
- 梁导艳郭春艳封青黄晓燕胡军
- 关键词：肺炎支原体视黄醇结合蛋白T细胞亚群
- 血小板膜糖蛋白Ⅱb、Ⅲa基因多态性与急性缺血性脑卒中的关系研究被引量：7
- 2019年
- 背景血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa受体与纤维蛋白原有效结合是血小板聚集、血栓形成的最后通路,近年来从分子生物学角度研究GP基因多态性与急性缺血性脑卒中(AIS)的关系成为研究热点。目的分析GPⅡb、Ⅲa基因多态性与AIS的关系。方法选取2017年10月—2018年11月陕西省人民医院神经内一科收治的AIS患者110例作为病例组,另选取同期在门诊体检中心的体检健康者90例作为对照组。比较两组受试者一般资料(包括性别、年龄及吸烟、饮酒情况)、实验室检查指标〔包括PAC-1阳性血小板百分比、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FPG)及同型半胱氨酸(Hcy)〕及GPⅡb、Ⅲa基因型和等位基因分布频率,并比较不同GPⅡb、Ⅲa基因型患者PAC-1阳性血小板百分比。结果 (1)两组受试者男性比例、年龄、吸烟率、饮酒率及TG比较,差异无统计学意义(P>0.05);病例组患者PAC-1阳性血小板百分比、TC、FPG、Hcy高于对照组(P<0.05)。(2)病例组与对照组受试者基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。病例组患者GPⅡb ab基因型、bb基因型及b等位基因分布频率高于对照组(P<0.05);两组受试者GPⅢa基因型和等位基因分布频率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)GPⅡb bb基因型患者PAC-1阳性血小板百分比高于aa基因型(P<0.05)。(4)不同GPⅢa基因型患者PAC-1阳性血小板百分比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GPⅡb基因多态性与AIS的发生有关,携带b等位基因者可能通过增强血小板活化程度而增加AIS发生风险,而GPⅢa基因多态性则与AIS的发生无关。
- 山媛崔小丽蒋锋梁导艳孙晶莹
- 关键词：卒中
- 三株交叉反应性的流感病毒HA抗体与H1N1流感病毒的致病机制分析
- 2019年
- 目的:结合临床甲型流感病例分析流感病毒可能的致病机理。方法:收集87份陕西省2009年甲型H1N1流感重症,危重症及死亡病例的血常规参数,对其淋巴细胞、红细胞和血小板三个指标分析。制备针对甲型H1N1的单克隆抗体,采用抗体亚类鉴定试剂盒分析其抗体轻链和重链的亚型,通过血凝活性实验检测三株抗体的血凝抑制活性,通过ELISA检测三株抗体与人和小鼠的血红蛋白、红细胞、白细胞膜和血小板膜的反应,通过免疫组化分析三株流感病毒抗体与正常小鼠肺组织的结合。结果:流感病毒感染后的死亡病例中淋巴细胞、红细胞和血小板均明显降低。三株抗体与人和小鼠的淋巴细胞、红细胞和血小板均有不同程度的交叉反应;免疫组化结果同时也证实三株HA抗体与小鼠的肺组织有不同的结合力。结论:流感病毒致病的原因可能与流感病毒感染机体后产生的抗体可与血液和组织中的成分结合有关。
- 李慧瑾李慧瑾孙丽君孙晶莹赵向绒梁导艳李元
- 关键词：H1N1流感病毒血凝素
- 羟基红花黄色素A通过抑制动脉内皮细胞中TNFR1/NF-κB信号通路而发挥抗炎作用被引量：19
- 2015年
- 目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对小鼠动脉血管内皮细胞肿瘤坏死因子α受体1/核因子κB(TNFR1/NF-κB)信号通路的作用。方法以(1.2、12、120)μmol/L HSYA预处理体外培养的小鼠动脉血管内皮细胞,之后以肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导细胞,采用Western blot法检测HSYA对TNFR1介导NF-κB信号通路相关蛋白核因子κB抑制蛋白α(IκBα)表达的影响;采用实时定量PCR检测HSYA对TNF-α诱导的NF-κB下游分子细胞间黏附分子1(ICAM-1)和E选择素(E-selectin)mRNA表达的抑制作用;采用流式细胞术检测细胞膜TNFR1表达量的变化;利用TNF-α转化酶(TACE)抑制剂TAPI-0检测TACE是否参与HSYA对TNFR1介导信号的抑制作用。结果 HSYA可呈剂量依赖性抑制TNFR1介导的NF-κB上游分子IκBα蛋白降解;HSYA可显著抑制NF-κB下游分子ICAM-1和E-selectin的mRNA表达;HSYA可显著减少细胞膜TNFR1蛋白含量;TAPI-0可抑制HSYA对TNFR1信号的调控作用。结论 HSYA可抑制血管内皮细胞中TNFR1/NF-κB信号通路而发挥抗炎作用,TACE参与介导HSYA的抗炎作用。
- 刘金连王海芳马淑惠霍雪萍梁导艳曹情雯胡军刘勤社
- 关键词：羟基红花黄色素A抗炎作用
