沈晶
- 作品数：1 被引量：22H指数：1
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 产气荚膜梭菌菌落多重PCR方法的建立及初步应用被引量：22
- 2013年
- 根据GenBank中已发布的产气荚膜梭菌α、β、ε、ι毒素基因序列,分别设计并合成针对4种毒素基因的特异引物,通过优化多重PCR反应条件,建立1种简单的产气荚膜梭菌定型菌落多重PCR方法。结果显示:A、B、C、D、E 5型产气荚膜梭菌参考菌株均扩增出了相应的预期目的条带,而大肠杆菌、巴氏杆菌和芽孢杆菌则均未能扩增出相应条带;将单个菌落稀释100倍,仍能扩增出相应的目的片段,该方法对B型和E型参考菌株最低检测量分别为2.6×l04 cfu/mL、1.2×l04 cfu/mL。应用该多重PCR方法从106份样品中检测到30株产气荚膜梭菌且均为A型,其中病死鸡的盲肠内容物分离率为36.5%(19/52),健康鸡群新鲜粪便样品分离率为20.4%(11/54)。本研究建立的多重PCR方法特异性强,敏感度高,重复性好,可以有效进行产气荚膜梭菌的快速检测及5种血清型的鉴别,对产气荚膜梭菌的感染及食品安全问题的研究均具有重要意义。
- 董洁杨晓静苗承霞沈晶杨柳姜艳芬许信刚
- 关键词：产气荚膜梭菌血清型
