牟小东
- 作品数：5 被引量：32H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目中央高校基本科研业务费专项资金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸭传染性产蛋减少症(暂定名)的病原分离初报被引量：29
- 2011年
- 本文对2010年在成年蛋鸭中流行的以产蛋下降为特征的未知疫病病原进行了初步鉴定。病原能在鸭胚、鸡胚和细胞上复制增殖,对鸭胚、鸡胚的致死率达100%。鸭胚病毒分离物不具有血凝性,在透射电镜下可观察到直径为50~100 nm、有囊膜带突起的病毒粒子。病毒对酸敏感、能耐受pH9的碱性环境,50℃1 h可使病毒失去感染能力。SPF鸡人工感染试验结果显示,感染鸡生长缓慢、致死亡率低、能回收病毒。说明引起鸭产蛋量下降的疫病病原是病毒性的,并导致鸡感染发病,我们将此病暂称为鸭传染性产蛋减少症。
- 廖敏牟小东耿阳边葶苈陆新浩陈秋英任祖伊丁铲周继勇
- 关键词：蛋鸭产蛋下降病毒分离鉴定
- 传染性支气管炎病毒非结构蛋白nsp5在真核细胞中的重组表达及鉴定被引量：1
- 2012年
- 本文以嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)毒株的RNA为模板,通过RT-PCR扩增获得IBV非结构蛋白5(non-structural protein,nsp5)基因片段后,构建了杆状病毒重组质粒IBVnsp5-Bacmid。IBVnsp5-Bacmid转染Sf9细胞,获得nsp5重组杆状病毒,经(immunofluorescence assay,IFA)和Western blot检测到转染细胞表达的nsp5蛋白。进一步从感染的细胞中纯化重组蛋白,并用纯化的蛋白免疫小鼠制备了抗nsp5的多抗血清,该多抗血清可检测到IBV四川株SC021202感染的DF-1细胞中特异性的nsp5蛋白。结果表明IBV nsp5在Bac-to-Bac真核表达系统中获得了成功表达,而且具有良好的免疫原性和反应原性。
- 耿阳牟小东刘然边葶苈廖敏周继勇
- 关键词：传染性支气管炎病毒
- 传染性支气管炎病毒非结构蛋白nsp15的体外表达及其单克隆抗体的制备被引量：2
- 2016年
- 以实验室保存的肾型传染性支气管炎病毒(IBV)毒株SC021202作为模板,扩增IBV非结构蛋白nsp15基因后,成功构建了原核表达载体PET-28a(+)-nsp15,将其转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达出约45ku的目的蛋白。纯化的nsp15蛋白可与IBV感染鸡血清发生良好反应。用纯化的重组nsp15蛋白免疫小鼠,制备单克隆抗体。经过3轮有限稀释和筛选阳性克隆,最终获得3株稳定分泌nsp15蛋白抗体的细胞株,分别为1A6、2B6和4D7。Western-blot分析显示,3株单克隆抗体都与nsp15蛋白有很好的特异性反应。IFA检测显示,nsp15单克隆抗体与IBV感染的细胞和nsp15基因转染的细胞均出现明显的反应。IBV nsp15单克隆抗体的制备为传染性支气管炎流行病学的监测、鉴别诊断及对其蛋白功能的进一步研究奠定了基础。
- 李乐超石婷婷郎咸勇牟小东王丹丹周继勇廖敏
- 关键词：传染性支气管炎病毒单克隆抗体
- 鸡传染性支气管炎病毒RT-PCR检测方法建立及非结构蛋白nsp15单克隆抗体的制备
- 根据GenBank上400多株IBV病毒的S1基因序列设计特异性RT-PCR引物扩增S1基因从91位碱基至303位碱基的213bp的保守区域。对该引物的PCR程序进行引物浓度、退火温度、延伸时间、PCR循环数等条件设置梯...
- 牟小东
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒非结构蛋白单克隆抗体PCR检测
- 鸡传染性支气管炎病毒不同基因型毒株的通用或鉴别RT-PCR方法的建立
- 前言禽传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由禽传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis vi-rus,IBV)引起的鸡急性、高度接触性传染病。随着IBV分离鉴定技术的...
- 牟小东廖敏周继勇
- 文献传递
