为实现低温生物甲烷高效转化与发酵系统稳定运行,应探索提高低温沼气发酵细菌代谢能力途径与冷适机制。研究以发酵温度(10、15、18、22、25°C和30°C)为驱动因子,人工培养基定向富集自然低温生境混合菌群,考察沼气发酵细菌低温生物甲烷转化效能,并耦合454高通量测序和PCR-DGGE解析低温混合菌群落结构。结果表明,低温生境混合细菌最优势细菌类群为Clostridium XI sp.,占细菌总数的40.9%,确定分类地位的产甲烷菌有Methanosaeta sp.和Methanobacterium sp.。低温沼气发酵细菌在18°C富集培养的沼气产量最高,可达220 ml L^(-1)reactor d^(-1),甲烷含量为56.8%。