陈涛
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- 桉叶油联合维甲酸对SD胎鼠脑组织Pax3和缝隙连接蛋白43表达的影响
- 2016年
- 目的探讨桉叶油联合维甲酸（RA）对SD胎鼠脑组织转录因子Pax3、缝隙连接蛋白43（Cx43）表达的影响。方法 SD孕鼠42只,随机分为6组,每组7只,正常对照组,RA组,溶剂对照组（花生油＋RA）,3个实验组（桉叶油高、中、低剂量＋RA）。正常对照组自由摄食饮水,溶剂对照组于孕第7～14天每只花生油2ml灌胃,每天1次,孕第10天40mg/kg RA灌胃1次。桉叶油3个剂量组于孕第7～14天分别桉叶油300、200和100mg/kg灌胃,每天1次,孕第10天40mg/kg RA灌胃1次。RA组于孕第10天40mg/kg RA灌胃1次。各组于孕21天处死孕鼠取胚胎,Western blotting、免疫组织化学技术检测胎鼠脑组织的Pax3、Cx43蛋白的表达。Real-time PCR检测脑组织Pax3、Cx43 mRNA表达。阿利新蓝和茜素红进行骨骼染色,体视显微镜下观测椎骨发育,脊柱间隙。结果维甲酸灌胃各组胎鼠椎骨数量异常的胎鼠数与正常对照组比较差异无显著性,但在维甲酸灌胃各组中,胎鼠椎骨形态异常的异常率和胎鼠椎骨分裂的百分率最低值分别为55%（桉叶油高剂量＋RA组）和45.8%（桉叶油低剂量＋RA组）,较正常对照组高（0）（P〈0.05）。在维甲酸灌胃各组中,桉叶油各组胎鼠椎骨形态异常的异常率和胎鼠椎骨分裂的百分率最高值分别为62.5%（桉叶油低剂量＋RA组）和55.0%（桉叶油高剂量＋RA组）,较维甲酸组（73.7%,73.7%）和溶剂对照组低（68.2%,63.6%,P〈0.05）。与正常组胎鼠比较,维甲酸灌胃各组大脑组织的Pax3、Cx43蛋白及其mRNA的表达较正常组高（P〈0.05）,在维甲酸灌胃各组中,桉叶油灌胃各组胎鼠脑组织Pax3、Cx43蛋白及其mRNA的表达较单纯RA灌胃组低,其差异有统计学意义（P〈0.05）。结论桉叶油对维甲酸引起胎鼠神经管缺陷有一定的拮抗作用。其机制可能与桉叶油拮抗维甲酸上调胎鼠神经组织的Pax3、Cx43蛋白过度表达有关。
- 苏丽莉余永莉陈默张彬渝陈涛刘茂生张裕
- 关键词：桉叶油维甲酸PAX3缝隙连接蛋白43实时定量聚合酶链反应
- 桉叶油含药血清联合维甲酸对体外培养神经干细胞Pax3及Cx43的影响
- 2018年
- 目的探讨桉叶油联合维甲酸(RA)对神经干细胞Pax3、Cx43蛋白及基因表达水平的影响。方法原代培养神经干细胞并进行鉴定,收集传代后第二代的神经干细胞,分别加入5%鼠血清(自由饮食SD大鼠血清,溶剂花生油灌胃鼠血清,桉叶油1 500、1 000、300 mg/kg灌胃鼠血清),5%鼠血清联合RA(5μmol/L)(自由饮食SD大鼠血清+RA,溶剂花生油灌胃鼠血清+RA,桉叶油1 500、1 000、300 mg/kg灌胃血清+RA)和RA(5μmol/L)培养48 h,收集细胞,提取蛋白,采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测细胞Pax3、Cx43蛋白表达水平;提取RNA,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞Pax3、Cx43基因表达水平。结果 (1)用5%鼠血清作用于细胞后,与正常血清组比较,桉叶油含药血清各组的Cx43蛋白及mRNA表达水平均较高(P<0.05),Pax3蛋白及mRNA表达水平均较低(P<0.05),提示桉叶油含药血清具有上调细胞的Cx43蛋白及其mRNA表达,下调细胞Pax3蛋白和mRNA表达的作用。(2)用5%鼠血清联合RA作用于细胞后,与单纯RA组比较,血清各组Pax3蛋白及mRNA表达水平均降低(P<0.05);桉叶油含药血清各组的Pax3蛋白及mRNA表达水平均较正常血清组显著降低(P<0.05)。(3)与单纯RA组比较,血清各组Cx43蛋白及mRNA表达水平均降低;但桉叶油含药血清各组的Cx43蛋白及mRNA表达水平与正常血清组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 (1)桉叶油含药血清具有上调细胞的Cx43蛋白及其mRNA表达,下调细胞Pax3蛋白和mRNA表达的作用。(2)桉叶油含药血清具有拮抗RA上调细胞的Pax3、Cx43蛋白及其mRNA表达的作用。
- 胡晓芳余永莉陈涛张彬渝刘茂生苏丽莉
- 关键词：桉叶油维甲酸神经干细胞PAX3连接蛋白43
