刘欣欣
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 稳定表达叶酸受体α的C26细胞株的建立
- 2015年
- 目的建立稳定表达叶酸受体α(FRα)的C26细胞,用于FRα基因疫苗的后续研究。方法采用脂质体转染法,将前期构建的重组真核表达质粒pc DNA3.1-FRα基因导入C26细胞,用G418加压进行筛选,并通过单克隆操作,建立稳定转染叶酸受体α基因的单克隆细胞株。利用反转录PCR及免疫荧光细胞化学染色检测稳定转染细胞中叶酸受体α基因的表达情况,并利用反转录PCR检测传代细胞中FRα基因表达的稳定性。结果经转染、G418筛选以及单克隆化操作,得到单克隆FRα基因稳定转染细胞株,所得单克隆稳定转染细胞株可表达FRαmRNA及蛋白,并能够在多次传代后保持表达的稳定性。结论成功构建了FRα稳定转染细胞株。
- 邱郑邢黎军刘欣欣张梅张芳王旻
- 关键词：叶酸受体Α稳定转染细胞株
- 叶酸受体α与卵巢肿瘤被引量：1
- 2012年
- 卵巢肿瘤的死亡率为妇科肿瘤之首,积极探索早期卵巢癌的筛查方法和新型治疗药物,对降低死亡率具有重要意义。叶酸受体α(FRα),对叶酸具有高度亲和性。在生理情况下,叶酸受体α仅低度表达于少数正常组织细胞,而在多种人类上皮源性肿瘤中,尤其是卵巢肿瘤中,都可以检测到高水平表达的叶酸受体α。卵巢上皮癌中有90%以上可见叶酸受体α的高表达,其在卵巢肿瘤中的表达水平可高于正常10～100倍。更为重要的是,叶酸受体α在早期卵巢肿瘤中有很高的阳性率。叶酸受体α为一种极具潜力的卵巢癌相关性的肿瘤抗原,可以作为卵巢肿瘤早期诊断标志物,以及卵巢肿瘤被动免疫治疗的靶点。
- 周希彬邱郑刘欣欣张娟何瑶玉王筱蒙王旻
- 关键词：卵巢肿瘤叶酸受体Α肿瘤抗原
- 叶酸受体α真核表达载体的构建及在HEK293细胞中表达的鉴定被引量：1
- 2013年
- 从高表达叶酸受体α的卵巢癌细胞株SKOV3中提取总RNA,RT-PCR扩增FRα基因片段,使用HindⅢ和EcoRⅠ双酶切后克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,对其进行酶切及测序鉴定;用脂质体介导法将重组质粒转染入人胚肾细胞HEK293中,并利用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色检测细胞内FRα基因的表达情况。通过RT-PCR扩增得到750 bp左右的FRα基因片段,并构建了真核表达重组质粒,经酶切、测序鉴定正确。转染HEK293细胞后,RT-PCR检测到细胞中FRαmRNA的存在,Western blot、细胞免疫荧光证明FRα蛋白在细胞中的表达。成功构建了FRα基因的真核表达重组质粒,该质粒可在真核细胞中表达FRα蛋白,这些实验结果为卵巢癌基因疫苗的研究奠定了基础。
- 刘欣欣邱郑王筱萌邢黎军张娟张芳王旻
- 关键词：卵巢癌叶酸受体Α真核载体DNA疫苗
