卢晓霞
- 作品数：10 被引量：13H指数：3
- 供职机构：山西省生物研究所更多>>
- 发文基金：山西省国际科技合作计划山西省自然科学基金山西省青年科技研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程文化科学更多>>
- 可溶性重组人组织因子(rhTF_(243))分泌型表达载体的构建和表达被引量：3
- 2007年
- 目的:构建含有TF的胞外区和跨膜区基因的phoA-TF243分泌型表达载体,在大肠杆菌中以可溶形式表达重组人组织因子(rhTF243)。方法:从人胎盘组织中提取总RNA,以RT-PCR扩增获得目的基因,并克隆到phoA载体中,在大肠杆菌MM294中表达rhTF243,产物采用免疫亲合层析进行纯化。结果:通过低磷酸盐诱导工程菌,获得重组人组织因子(rhTF243) ,表达水平占菌体总蛋白量的16 .3 %,经免疫亲合层析纯化,产物纯度达到95 %以上,分子量为27 .4kD。结论:获得了rhTF243,具有与完整分子完全相同的凝血功能。
- 赵邑齐延红潘薇薇卢晓霞刘彦萍赵峰梅
- 关键词：基因克隆大肠杆菌分泌表达
- 人重组组织因子制备凝血酶原时间测定试剂的研究
- 凝血酶原时间(PT)测定是定量检测外源性凝血因子缺陷和监控抗凝治疗的重要指标, 在临床上用于术前筛查病人的出凝血机能是否正常,进行血栓形成预测,出血疾病的诊断等． PT测定是指在37℃下,有Ca2+存在时,凝血活酶与血浆...
- 赵邑赵峰梅齐延红卢晓霞潘薇薇刘彦萍
- 文献传递
- 人脑金属硫蛋白3(MT-3)原核载体的构建、表达及纯化
- 2017年
- 为探讨采用基因工程技术构建小分子人MT-3蛋白原核表达载体的可能性,以MT-3 c DNA序列为模板,采用聚合酶链式反应引入双酶切位点,定向亚克隆至pho A分泌型原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞构建重组工程菌,经0.05 mmol/L低磷培养基培养诱导重组MT-3表达,利用金属螯合柱分离纯化后,利用SDS-PAGE、Western blot、紫外光谱扫描及金属结合能力分析对其进行鉴定。结果成功构建了pho A-MT-3原核表达载体,重组工程菌经诱导后以可溶形式表达重组MT-3蛋白。SDS-PAGE、Western blot和紫外光谱扫描分析证实重组MT-3表达成功。金属结合能力分析结果显示目的蛋白仍具有结合金属离子的生物学功能,实现了小分子MT-3的体外分泌重组表达。本研究成功实现了小分子人MT-3蛋白的重组制备,为MT-3的规模化应用奠定基础。
- 卢晓霞谢海军赵邑何永吉
- 关键词：神经生长抑制因子
- 黄曲霉毒素M_1酶联免疫吸附检测方法的建立被引量：6
- 2017年
- 建立单抗-多抗夹心酶联免疫吸附(ELISA)检测方法,为黄曲霉毒素M_1(AFM_1)的快速检测及研究奠定基础。采用有机合成法将AFM_1转化成半抗原AFM1肟化物(AFM1O),进一步与载体蛋白钥孔血蓝蛋白(KLH)和卵清蛋白(OVA)偶联合成完全抗原AFM_1-KLH和AFM_1-OVA;以AFM_1-KLH为免疫抗原、AFM_1-OVA为筛选抗原,采用杂交瘤技术制备AFM1单克隆抗体,以AFM_1-KLH免疫新西兰大白兔制备兔多克隆抗体;以AFM_1-OVA为标准蛋白,制备的单克隆抗体为捕获抗体,纯化的兔多克隆抗体为检测抗体,商品化HRP标记的山羊抗兔Ig G作为检测二抗,采用方阵滴定法优化各步检测条件,得到最佳试验条件,建立AFM1夹心ELISA检测方法。标准曲线方程为y=0.004 4x+0.002 1(R2=0.992 2),检测范围0.5 ng/m L^128 ng/m L;最低检测限为0.5 ng/m L,批内和批间差均小于10%,重复性良好。
- 卢晓霞谢海军宋崴赵邑何永吉
- 关键词：抗体ELISA
- 一种红曲亚麻籽饼粕发酵物及其应用
- 本发明公开了一种红曲亚麻籽饼粕发酵物及其应用，属于食品加工技术领域。一种红曲亚麻饼粕发酵物，是按照以下步骤制备获得的：（1）亚麻籽饼粕初次脱毒：控制亚麻籽饼粕含水量170～200g/kg，800W微波脱毒8min；（2）...
- 王慕华潘佩平宋崴邓占国王宇宏苏槟楠蔡颖慧李旭霞卢晓霞宫俊峰
- 人重组组织因子微颗粒的制备研究被引量：1
- 2017年
- 采用磷脂酰胆碱(DOPC)、磷脂酰丝氨酸(DOPS)2种合成磷脂,按照6∶4、7∶3、8∶2的比例(摩尔比),分别以磷脂质量浓度为2.0%、2.5%、3.0%的混合溶液,超滤交换,制备9种双层磷脂微颗粒(MP),MP与人重组组织因子(rhTF243)脂化,得到人重组组织因子的磷脂微颗粒(rhTF243+MP)。经PT方法检测比较9种rhTF243+MP的凝血活性、稳定性及储存时间,确定最佳磷脂配比、浓度及制备工艺,制备具有稳定促凝血活性的rhTF243+MP。
- 赵峰梅卢晓霞卢晓霞潘薇薇潘薇薇张全爱
- 关键词：磷脂酰丝氨酸
- 人TRAIL酶联免疫吸附检测方法的建立
- 2016年
- 本研究利用重组表达的s TRAIL蛋白作为免疫抗原,分别制备了其单克隆抗体和兔源多克隆抗体,并以其为标准蛋白,建立了敏感、准确、特异性强的TRAIL夹心ELISA方法,为TRAIL蛋白在肿瘤中的监测和治疗奠定了基础。
- 卢晓霞赵峰梅张全爱苏小芳刘福
- 关键词：TRAIL抗体ELISA
- 一种利用HCIC快速纯化抗rhTF_(243)单克隆抗体方法的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:建立从小鼠腹水中快速纯化抗人重组组织因子243(recombine human tissue factor243,rhTF243)单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的方法。方法:含抗rhTF243单克隆抗体的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换等预处理后,先经疏水电荷诱导层析纯化处理,去除大部分杂蛋白,再经Protein A-Sepharose CL-4B亲和层析柱进一步纯化。结果:经两步纯化后获得抗rhTF243单克隆抗体,其生物学活性高、纯度大于95%,抗体效价保持良好,抗体总回收率达73%,且具有明显的抗促凝作用。结论:建立的单克隆抗体纯化方法简便、高效,所得mAb的纯度高、生物学活性好。
- 赵峰梅齐延红何永吉潘薇薇卢晓霞粱雅丽赵邑
- 关键词：MEPPROTEIN单克隆抗体腹水纯化
- Pyk2激酶区基因重组杆状病毒表达载体的构建及表达
- 2012年
- 采用PT-PCR扩增Pyk2-kinase基因,定向克隆至转移载体pFastBac HTB,转化到含穿梭载体Bacmid的感受态细菌DH10Bac中,转座后利用抗性及蓝白斑筛选阳性克隆获得重组Bacmid/Pyk2-kinase;提取重组杆粒,PCR法鉴定后转染昆虫细胞Sf9包装重组杆状病毒;利用病毒感染Sf9细胞进行蛋白表达,通过间接免疫荧光(IFA)、SDS-PAGE和Western blot检测表达情况。最终获得了重组杆状病毒rBac-Pyk2-kinase,实现了Pyk2-kinase在Sf9细胞中的重组表达,其相对分子质量为32 ku,IFA、SDS-PAGE和Western blot检测结果与预期一致。
- 何永吉卢晓霞粱雅丽潘薇薇赵峰梅赵邑
- 关键词：PYK2杆状病毒
- 山西省应用基础研究计划项目过程管理中若干问题的认识与思考被引量：1
- 2018年
- 根据山西省应用基础研究计划项目管理最新情况,探讨了山西省项目管理专业机构对于项目全过程管理工作的主要内容、常见问题,并提出了建立专业化项目管理队伍、建立完善的管理制度、建立良好的风险控制机制等策略,以提升山西省应用基础研究计划项目管理工作水平。
- 李旭霞孔晓俊卢晓霞曹睿王欣邢盼盼
- 关键词：项目管理
