- Ag85A基因修饰的树突状细胞疫苗抗膀胱癌的实验研究
- 实验目的：
膀胱癌是泌尿系统最常见的肿瘤。膀胱肿瘤的发生和复发主要与机体免疫功能低下、肿瘤细胞逃逸机体的免疫监视有关，如何提高膀胱肿瘤患者的免疫功能成为治疗和预防膀胱肿瘤复发的关键，因而肿瘤的免疫治疗方法越来越受关...
- 张佩
- 关键词：树突状细胞疫苗膀胱肿瘤抗肿瘤实验
- Ag85A真核表达重组体的构建及稳定转染细胞系的建立被引量：2
- 2009年
- 构建结核杆菌抗原85A(Ag85A)的真核表达重组体,转染L929细胞,建立稳定转染细胞系。从质粒V1Jns.tPA-Ag85A中经PCR扩增出Ag85A基因,利用DNA重组技术将其插入到真核表达载体pcDNA3.1/myc-HisA中,经酶切和测序鉴定后,脂质体转染法转染L929细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,Western Blot检测Ag85A的表达。成功构建pcDNA3.1/myc-HisA-Ag85A真核表达载体并稳定转染L929细胞,成功表达了目的基因。为进一步研究Ag85ADNA疫苗对结核杆菌的免疫防护作用奠定了基础。
- 刘滢张佩冯永辉王大南徐佳吕昌龙
- 关键词：AG85A真核表达载体转染
- 黑大蒜提取物对小鼠细胞免疫应答影响的初步探讨被引量：29
- 2010年
- 目的:探讨黑大蒜提取物对BALB/c小鼠细胞免疫功能的影响。方法:连续5天给予小鼠腹腔注射黑大蒜提取物溶液。从第6天开始处死鼠,分离培养脾细胞,生物学方法检测自然杀伤(NK)细胞杀伤活性,Griess法检测脾细胞培养上清一氧化氮(NO)的分泌水平,ELISA法检测脾细胞培养上清IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α的水平,RT-PCR方法检测脾细胞FasLmRNA的表达水平。结果:黑大蒜提取物能显著增强NK细胞杀伤活性,促进NO和Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α的分泌,IL-4水平略有降低,脾细胞FasLmRNA的表达水平未见明显变化。结论:黑大蒜提取物对小鼠细胞免疫应答具有一定的促进效应。
- 冯永辉王庆辉王美茹张佩王大南吕昌龙
- 关键词：细胞免疫TH1/TH2细胞因子
- 乌贼墨对免疫低功小鼠的免疫促进作用被引量：8
- 2010年
- 目的探讨乌贼墨促进免疫低功小鼠免疫功能的作用。方法按0.1,0.25和0.5mL剂量给C57BL/6小鼠灌胃5%的新鲜乌贼墨,每日1次,连续7d,并在给药的第1日和第2日同时腹腔注射环磷酰胺造成免疫功能低下模型,第9日检测小鼠免疫功能的变化。结果乌贼墨可促进免疫低功小鼠的脾淋巴细胞增殖;增强NK细胞杀伤活性;提高免疫效应分子TNF-α,IFN-γ及一氧化氮(NO)的产生水平。结论乌贼墨可增强固有免疫细胞和特异性免疫细胞的活性,调节细胞因子和效应分子的分泌,刺激免疫低功小鼠的免疫功能恢复。
- 关玲敏王庆辉张佩冯永辉王美茹王大南吕昌龙
- 关键词：免疫功能淋巴细胞NK细胞细胞因子
- 口服脂质体包裹Ag85A DNA疫苗诱导抗体的产生
- 2009年
- 制备脂质体包裹的Ag85A口服DNA疫苗,并观察小鼠口服后所诱生的抗体产生情况。用脂质体包裹重组质粒pcDNA3.1/myc-HisA-Ag85A制备口服DNA疫苗,并用脂质体包裹空质粒pcDNA3.1/myc-HisA作为对照。将C57BL/6小鼠随机分为3组,即生理盐水组、空质粒组和重组质粒DNA疫苗组。分别将生理盐水、空质粒和重组质粒DNA疫苗以灌胃方式投给各组小鼠,共免疫3次,每次间隔14d,末次免疫后14d处死小鼠,ELISA法检测血清中Ag85A特异性抗体水平,放射免疫法测定肠组织中分泌型IgA(sIgA)含量。重组质粒组血清中Ag85A特异性抗体滴度为1160,空质粒组和生理盐水组血清中均未捡出Ag85A特异性抗体。重组质粒组肠组织中sIgA含量(0.3761±0.0456)μg/mL较空质粒组(0.2374±0.0414)μg/mL和生理盐水(0.1993±0.0899)μg/mL组显著增高(P<0.05),而空质粒组和生理盐水组未见有意义的变化(P>0.05)。口服脂质体包裹Ag85ADNA疫苗可诱导外周特异性抗体的产生和肠道黏膜局部sIgA的水平的升高。
- 王大南刘滢张佩冯永辉单风平Seif S.Salum Mchenga吕昌龙
- 关键词：AG85ADNA疫苗脂质体
