李凯婧
- 作品数:2 被引量:3H指数:1
- 供职机构:中山大学中山医学院眼科学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 视黄酸-AP-1信号通路对视网膜色素上皮细胞分泌TGF-β2的调控机制被引量:2
- 2019年
- 【目的】研究上调视黄酸(RA)信号以及抑制活化蛋白-1(AP-1)转录活性对RPE分泌转化生长因子β2(TGF-β2)的影响以及可能的作用途径。【方法】①检测ATRA干预的作用,将ARPE-19细胞分为:正常对照组和6、12、24、48h组,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、westernblot和免疫荧光检测RARβ和c-Fos的表达。②检测RARβ抑制剂LE540对ATRA诱导后细胞表达RARβ和c-Fos的影响,将ARPE-19细胞分为:正常对照组,ATRA组,LE540组和ATRA+LE540组,用RT-qPCR和westernblot检测RARβ和c-Fos的表达。③检测AP-1抑制剂T-5224干预的作用,将ARPE-19细胞分为:正常对照组和12、24、48h组,用电泳迁移率变动分析法(EM?SA)检测RPE细胞中AP-1活性。④检测LE540和T-5224对ATRA诱导后细胞表达和分泌TGF-β2的影响,将ARPE-19细胞分为正常对照组,ATRA组,ATRA+LE540组和ATRA+T-5224组,用westernblot和酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测TGF-β2的表达和分泌量。【结果】ATRA干预24和48h后,RARβ的表达较对照组明显升高(P<0.05),c-Fos的表达先升后降,ATRA干预6和12h后,c-Fos表达明显升高(P<0.01),而干预48h后,c-Fos表达下降,与对照组相比无统计学差异(P>0.05);T-5224干预24和48h后,AP-1的转录活性明显下降(P<0.01)。用LE540和T-5224干预48h后,ATRA+LE540组和ATRA+T-5224组TGF-β2的表达较ATRA组明显下降(P<0.05)。【结论】ATRA通过RARβ影响AP-1的转录活性,进而促进ARPE-19细胞分泌TGF-β2。
- 陈子成吴君舒余颖鑫李凯婧
- 关键词:视黄酸视网膜色素上皮细胞AP-1TGF-Β2
- 人皮肤源性间充质干细胞体外诱导向淋巴细胞分化的可能性(英文)被引量:1
- 2010年
- 背景:研究发现真皮组织中存在间充质干细胞,存在自体移植的可能性。如能在一定条件下将皮肤来源的间充质干细胞诱导分化为淋巴细胞,则可解决许多免疫系统损伤疾病。目的:探讨人皮肤源性间充质干细胞经体外诱导向淋巴细胞转分化的可能性。方法:体外培养人皮肤源性间充质干细胞至第14代,流式细胞仪检测细胞表面标志的表达。诱导人皮肤源性间充质干细胞转分化的条件培养基由人淋巴细胞培养上清液和新鲜人皮肤源性间充质干细胞培养液以7:3比例组成。倒置显微镜观察诱导后细胞形态学变化。流式细胞仪检测诱导后1~8d细胞表面淋巴细胞标志的表达。流式细胞仪检测诱导后3,6,9d人皮肤间充质干细胞自身标记表达的变化。结果与结论:人皮肤源性间充质干细胞稳定表达自身特异性标志CD73,Vimentin等,不表达造血系统特异性标志CD34,CD45等,且低表达HLA-I,完全不表达HLA-DR。诱导3d后,细胞体积明显增大,细胞增殖速度明显低于诱导前,细胞内和细胞间存在许多折光性强的囊胞样颗粒。除CD45淋巴细胞标志的表达无明显变化外,诱导后1~4d人皮肤源性间充质干细胞CD3,CD19,CD16,CD4,CD8的表达率均随诱导时间的延长呈线性升高趋势,诱导后5~8d处于平台期。诱导后3,6,9d人皮肤源性间充质干细胞自身标记CD73,CD34,Vimentin,HLA-DR的表达无变化,HLA-I的表达率随诱导时间的延长逐渐上升。提示在体外人皮肤源性间充质干细胞可以被诱导向淋巴细胞转分化,具有参与免疫系统损伤修复的潜能。
- 官立萍余杰黄冰罗挺黄健发刘茜林丽萍张敏李凯婧陈系古
- 关键词:淋巴细胞转分化干细胞