沈晓燕
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：苏州工业园区服务外包职业学院更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 限制性内切酶MluⅠ基因的合成、克隆和初步表达被引量：1
- 2016年
- 在已知基因序列但缺乏DNA模版的情况下,人工设计合成多条引物,采用重叠PCR技术体外人工合成899bp的MluⅠ基因和1 312bp的M.MluⅠ基因.并将合成的MluⅠ基因连接到表达载体pet30a上,重组表达载体构成pet30a-MluⅠ,将M.MluⅠ基因连接到表达载体PUC19上,重组表达载体构成PUC19-M.MluⅠ.测序结果显示,载体构建成功后利用体外重组转化技术,将pet30a-MluⅠ和PUC19-M.MluⅠ转入T7expression E.coli表达菌株中.重组工程菌经IPTG诱导,用SDS-PAGE鉴定,发现限制性内切酶MluⅠ成功表达.该酶的成功表达不仅为后续研究提供了材料,而且为实验室制备限制性内切酶在方法上开辟了新的途径,为更多新发现的内切酶基因的成功克隆提供了参考.
- 覃鸿妮钱莉春沈晓燕梅啸
- 关键词：限制性内切酶基因克隆基因表达
