目的探讨口腔鳞状细胞癌细胞中生物钟基因PER1对生物钟基因网络中其他生物钟基因表达的影响。方法采用RNA干扰技术沉默人口腔鳞状细胞癌SCC15细胞中PER1基因,应用流式细胞仪检测沉默后细胞的增殖和凋亡水平,实时荧光定量聚合酶链式反应检测生物钟基因CLOCK、BMAL1、PER1、PER2、PER3、DEC1、DEC2、CRY1、CRY2、TIM、CKIE、RORA、NPAS2、REV-ERBA m RNA的表达情况。结果 PER1基因沉默后,SCC15细胞增殖指数上升,凋亡指数下降(P<0.05);PER1、PER2、DEC1、DEC2、CRY1、CRY2和NPAS2 m RNA的表达水平降低(P<0.05),PER3、TIM、RORA和REV-ERBA m RNA的表达水平升高(P<0.05),CLOCK、BMAL1和CKIE m RNA的表达水平无统计学改变(P>0.05)。结论生物钟基因PER1能够调控生物钟基因网络中众多其他生物钟基因PER2、DEC1、DEC2、CRY1、CRY2、NPAS2、PER3、TIM、RORA和REV-ERBA的表达,PER1在生物钟基因网络中具有重要调控作用。
探讨生物钟基因PER2对人口腔鳞癌SCC9细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响和机理。利用RNA干扰技术沉默SCC9细胞中PER2基因,应用实时荧光定量PCR检测Ki-67、MDM2、P53、Bcl-2、Bax、C-myc、MMP-2、Timp-2和VEGFm RNA的表达改变;流式细胞仪检测沉默后细胞的增殖和凋亡水平,平板克隆形成实验检测细胞的克隆形成率,Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力的改变。沉默PER2基因后,SCC9细胞凋亡指数显著降低(p<0.05),细胞增殖指数、细胞迁移和侵袭能力显著升高(均p<0.05)。PER2沉默后Ki-67、MDM2、Bcl-2、C-myc、MMP-2和VEGF m RNA的表达水平显著升高(均p<0.05),p53、Bax和Timp-2 m RNA的表达水平显著降低(均p<0.05)。研究表明,生物钟基因PER2通过调控Ki-67、MDM2、P53、Bcl-2、Bax、C-myc、MMP-2、Timp-2和VEGF影响癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。因此,对PER2的深入研究有可能为癌症的治疗提供新的有效分子靶点。
