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袁晓峰
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
供职机构:
中山大学附属第三医院
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发文基金:
广东省科技计划工业攻关项目
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
李伟强
中山大学中山医学院干细胞与组织...
项鹏
中山大学中山医学院干细胞与组织...
胡晓俊
中山大学附属第三医院
彭朝权
中山大学附属第三医院
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2012
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利用多位点Gateway技术构建小鼠平滑肌肌动蛋白α基因启动子慢病毒载体
被引量:2
2012年
背景:平滑肌肌动蛋白α基因是相对局限于在血管平滑肌细胞中表达的少数几个基因之一,公认是血管平滑肌细胞表型转化的标志。目的:利用多位点Gateway技术构建慢病毒载体pLVpuro/平滑肌肌动蛋白α控制绿色荧光蛋白基因的表达。方法:设计合成含有attB位点的小鼠平滑肌肌动蛋白α基因启动子引物,构建pUp-平滑肌肌动蛋白α;通过LR反应将pUp-平滑肌肌动蛋白α和pDown-绿色荧光蛋白(含att位点的绿色荧光蛋白入门克隆)连接到目的载体pDEST-puromycin,得到pLVpuro/平滑肌肌动蛋白α-绿色荧光蛋白表达载体;经PCR和测序鉴定,将载体质粒瞬时转染C2C12细胞系,并且用免疫荧光染色检测基因的表达。结果与结论:成功构建pLVpuro/平滑肌肌动蛋白α-绿色荧光蛋白报告基因载体,测序结果表明启动子序列正确;细胞转染实验以及免疫荧光检测证实构建的报告基因载体可以反映平滑肌肌动蛋白α基因的表达情况。
袁晓峰
项鹏
李伟强
胡晓俊
彭朝权
关键词:
慢病毒
绿色荧光蛋白
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