刘丽慧
- 作品数：4 被引量：10H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 改良低温螯合法分离家兔小肠绒毛和隐窝细胞及分离效果鉴定
- 2016年
- 本试验旨在研究家兔小肠绒毛和隐窝细胞的分离方法,为深入研究小肠上皮结构与功能提供体外模型。试验以新西兰白兔为试验材料,在不同螯合剂浓度[5、10、15、20、25 mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)]和螯合温度(4、25℃)下分离小肠绒毛和隐窝细胞,检测所分离细胞团的产量、形态、细胞活率、完整性。结果表明:1)各螯合条件下分离的绒毛和隐窝细胞形态完整,基因组DNA与总RNA完整;2)螯合温度越高且EDTA浓度越大时,细胞富集率越高,但对细胞毒害作用也越强,4℃、5 mmol/L EDTA条件下绒毛和隐窝细胞富集率分别为7.75%和1.01%,绒毛相对完整率和隐窝细胞相对活率分别为91.67%和93.48%;25℃、25 mmol/L EDTA条件下绒毛和隐窝细胞富集率则分别高达17.89%和4.99%,但绒毛相对完整率和隐窝细胞相对活率仅为4.25%和5.17%;3)综合分析后确定,4℃、10 mmol/L EDTA条件下分离效果最佳;4)在最佳条件下所分离隐窝富集物的溶菌酶和α-防御素的相对表达量极显著高于绒毛富集物(P<0.01),显示细胞纯度较高;且隐窝细胞经培养9 h后溶菌酶和α-防御素的相对表达量未发生显著变化(P>0.05),显示细胞依然具有较高活力。由此可见,改良的低温螯合法适用于家兔小肠绒毛和隐窝细胞的高效分离。
- 沈雪梅李晶张刚崔宏晓刘丽慧姚军虎徐秀容
- 关键词：隐窝绒毛肠上皮细胞螯合剂家兔
- 獭兔肠黏膜乳杆菌的分离鉴定及其体外益生特性研究被引量：3
- 2017年
- 【目的】分离筛选适于在獭兔肠道中存活并定殖的高黏附性乳酸菌株。【方法】通过乳酸菌选择性培养基从5和10日龄哺乳獭兔肠黏膜中分离具有抑制大肠杆菌活性的菌株,经16SrRNA基因序列分析进行鉴定,并检测其耐人工胃液、耐胆盐及黏附特性、表面疏水性等益生特性。【结果】分离筛选出3株具有较强抑制大肠杆菌活性的菌株,分别鉴定为短乳杆菌(L1)、植物乳杆菌(L2)、干酪乳杆菌(L3),其抑菌活性大小为L3>L2>L1。3株菌株均能耐受pH=4.0的人工胃液;在pH=3.0人工胃液中,L2和L3的活菌含量未出现明显变化(P>0.05),而L1的活菌含量显著下降(P<0.05);3株菌株在pH=2.0和pH=1.8人工胃液中的活菌含量均显著降低(P<0.01)。L1和L2均能耐受2.0g/L胆盐;虽然L1和L2在3.0g/L胆盐中的活菌量出现极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)下降,但二者仍保留较高活菌含量;胆盐对L3的存活有明显抑制作用,随着胆盐含量的升高,L3的活菌含量极显著降低(P<0.01)。L2和L3对黏蛋白的黏附率无显著差异(P>0.05),均显著高于L1(P<0.05)。L3的表面疏水性最高,L2次之,二者之间无显著差异(P>0.05);L1的表面疏水性低于L2(P=0.092),显著低于L3(P<0.05)。【结论】分离所获得的3株乳杆菌均具备益生菌特性,其中以植物乳杆菌L2最佳。
- 李晶沈雪梅刘丽慧胡如久崔宏晓姚军虎徐秀容
- 关键词：乳杆菌人工胃液胆盐獭兔
- 梯度添加硝酸盐或硫酸盐对瘤胃体外发酵和总菌数量的影响被引量：4
- 2017年
- 为研究梯度添加硝酸盐或硫酸盐是否对瘤胃微生物有适应性,本试验以3只安装永久性瘤胃瘘管的成年萨能奶山羊为瘤胃液供体,应用体外产气法研究梯度添加硝酸盐或硫酸盐对瘤胃液批次发酵参数和总菌数量的影响。试验设对照组、硝酸盐组和硫酸盐组。处理组在第1~5d梯度添加2~5 mmol/L硝酸钠或硫酸钾,初始终浓度均为2 mmol/L,以1mmol/(L·d^(-1))增加至5mmol/L后保持浓度不变继续发酵24h,分别检测1~5d总产气量、pH、挥发性脂肪酸(VFA)、NH3-N和总菌数量。结果显示:1)第3~5天添加2~5mmol/L硝酸盐可显著降低总产气量(P<0.05),第1天添加2mmol/L硫酸盐显著降低总产气量(P<0.05);2)添加2~5mmol/L硝酸盐或硫酸盐对TVFA均无影响(P>0.05),但会不同程度地影响各VFA的浓度和百分比;3)添加2mmol/L硝酸盐对第1dNH3-N有提高趋势(P<0.10),显著提高了第2~5天NH3-N含量(P<0.05);第1~4天添加2~5mmol/L硫酸盐显著提高第5天NH3-N含量(P<0.05);4)添加2~5mmol/L硝酸盐和硫酸盐均对总菌数量无显著影响(P>0.05)。结果表明:梯度添加硝酸盐或硫酸盐可提高瘤胃批次发酵NH3-N含量,均不影响发酵液TVFA和总菌数量。
- 刘丽慧刘宝龙崔宏晓孙菲菲谢光中徐秀容
- 关键词：硝酸盐硫酸盐体外产气法瘤胃发酵
