刘之洋
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
- 供职机构：上海交通大学农业与生物学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- hrp基因关键调控因子HrpG在水稻白叶枯病菌和条斑病菌中的交叉互补性研究被引量：2
- 2014年
- 水稻自叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)和条斑病菌(X.oryzae pv.oryzicola,Xoc)在非寄主烟草上产生过敏反应(HR)和在寄主水稻上具有致病性,是由hrp致病岛决定的,其中HrppG为关键调控因子。Xoo和Xoc侵染水稻途径和在水稻上产生病害症状的不同,是否与hrpG基因有关,还不清楚。本研究利用反向遗传学方法获得了Xoo和Xoc的hrpG突变体:P△hrpG和R△hrpG,并用hrpG_(Xoo)基因和hrpG_(Xoc)基因分别互补上述2个突变体,获得了相应的互补菌株。致病性测定结果显示,P△hrpG和R△hrpG突变体丧失了在水稻上的致病性和在非寄主烟草上产生HR的能力,而hrpG_(Xoo)基因和hrpG_(Xoc)基因可分别互补上述突变体至野生型水平。利用GUS报告基因检测基因启动子活性发现,hrpG_(Xoo)和hrpG_(Xoc)的启动子活性没有显著差别;RT-PCR和Western杂交结果显示,hrpG基因交叉互补菌株中HrpG调控的下游基因hrpX、hpaR、hrcT、hpa2和hrpD6的表达没有差异,且Ⅲ型分泌系统分泌蛋白Hpa2的分泌性没有受到影响。这些结果表明,稻黄单胞菌hrpG基因可在Xoo和Xoc中交叉互置,位于其上游和下游的调控途径可能相似,而决定Xoo和Xoc在水稻上的侵染途径以及所致病害症状差异可能与hrpG基因位点无关。
- 熊鹂刘之洋邹华松邹丽芳陈功友
- 关键词：水稻白叶枯病菌水稻条斑病菌
- 水稻条斑病细菌hrp基因诱导表达系统的建立被引量：10
- 2007年
- 水稻条斑病细菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xooc)决定在非寄主植物上激发过敏反应(hypersensitive response)和在寄主水稻上具致病性(pathogenicity)的hrp基因簇是诱导表达的。为研究hrp基因的功能,利用hpa1和hrpX基因的启动子与gfp基因进行融合,构建了hrp基因诱导表达系统。绿色荧光蛋白表达揭示,Xooc的hrp基因在营养丰富的NB培养基上不能有效表达,在hrp诱导培养基XOM3上可有效表达。以hrpX和hrpG突变体为参照,RT-PCR研究结果提示,Xooc野生型菌株hpa1基因在NB上不能有效表达,在XOM3培养基上可有效表达。相应地,hrpX突变体中hpa1基因不能被诱导表达,而在hrpG突变体中hpa1基因转录表达水平低于野生菌。研究结果还证实,水稻悬浮细胞能高效诱导Xooc的hrp基因表达。Xooc hrp基因诱导表达系统的建立为研究hrp基因功能、发掘T3SS效应分子以及开展Xooc致病性研究奠定了基础。
- 肖友伦李玉蓉刘之洋向勇陈功友
- 关键词：HRP基因水稻RT-PCR
- 水稻细菌性条斑病菌Ⅲ型分泌系统分泌的效应蛋白的鉴定
- 由稻黄单胞菌稻生致病变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,简称Xoc)引起的水稻细菌性条斑病(bacterial leaf streak,BLS,简称条斑病),已成为为害我国南方稻区水稻上...
- 赵倩薛晓波刘之洋蔡璐璐马文秀邹丽芳邹华松陈功友
- 关键词：水稻条斑病菌过敏反应毒性
- 水稻黄单胞菌致病相关基因插入突变体系的建立被引量：4
- 2012年
- 水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)和条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xoc)是水稻上的模式病原菌,分别引起水稻白叶枯病(bacterial blight,BB)和细菌性条斑病(bacterial leaf streak,BLS)。为了精确和高效地实现目的基因的突变,本研究利用pK18mobGⅡ载体,建立了一套适于Xoo和Xoc目的基因定点插入的突变体系。通过同源片段与目的基因间的同源重组,成功获得了Xoo和Xoc的hrcV和hrpF突变体。PCR和Southern杂交证实:pK18mobGⅡ携带不同大小的同源片段,能够整合于hrcV和hrpF的特定位点;200～400 bp的同源片段能够获得最佳的突变效率;两亲接合的转化效率是电转化的5～100倍。毒性测定结果显示,hrcV基因决定着Xoo在水稻上的致病性。致病相关基因插入突变体系的建立为研究水稻黄单胞菌与水稻互作中致病相关基因的功能奠定了遗传学研究基础。
- 邹丽芳周丹刘之洋邹华松陈功友
- 关键词：水稻黄单胞菌插入突变
- 水稻条斑病菌hrpB1基因决定寄主致病性和非寄主过敏反应的功能研究被引量：2
- 2010年
- 水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzicola,Xoc)的hrp基因决定了病原菌在非寄主植物上的过敏反应(hypersensitive response,HR)和在寄主植物上的致病性(pathogenicity),基因产物形成Ⅲ型分泌系统(type-Ⅲ secretion system,T3SS)将致病性效应分子注入寄主细胞从而引起水稻产生抗病性或者感病性反应。以位于hrpB操纵单元的首个hr-pB1基因为对象,通过基因敲除方式对其进行了突变,发现hrpB1突变体丧失了在水稻上的致病性和在烟草上激发HR的能力,并且在水稻组织中的生长能力显著降低。RT-PCR测定结果表明,hrpB1的转录表达受HrpG和HrpX的正调控。免疫杂交结果显示,HrpB1蛋白可通过T3SS进行分泌。这些结果不仅明确了hrpB1基因在病原菌致病性中的功能,而且提示了hrp结构基因不仅仅局限于形成Ⅲ型分泌系统,部分hrp基因产物本身也通过Ⅲ型系统分泌到胞外,并且可能起到效应分子的功能。
- 刘之洋邹丽芳邹华松陈功友
- 关键词：水稻条斑病菌过敏反应
- 水稻条斑病菌hrpB1基因决定寄主致病性和非寄主过敏反应的功能研究
- 革兰氏阴性植物病原细菌含有高度保守的hrp基因簇,编码形成Ⅲ型分泌系统将致病性效应分子注入植物细胞中,通过改变寄主的生理代谢决定寄主植物的抗病性或者感病性.hrp基因的突变改变了病原细菌在非寄主植物上激发过敏反应(Hyp...
- 刘之洋邹丽芳邹华松陈功友
- 关键词：水稻条斑病菌功能分析
- 水稻白叶枯病菌hrpG调控基因的鉴定被引量：4
- 2015年
- 水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)引起的白叶枯病(bacterial leaf blight,BLB)是水稻上最严重的细菌病害之一。Xoo与寄主水稻的互作依赖由hrp基因编码的Ⅲ型分泌系统(Type Ⅲ secretion system,T3SS),将效应蛋白(T3SS effectors,T3SEs)注射入水稻细胞,引起BLB症状的扩展。HrpG是hrp基因转录表达的主要调控因子。为了鉴定未知的hrpG调控子,本研究在以hrpG∷gusA为报道基因构建的转座子突变体库中,筛选获得4个候选的hrpG负调控子突变体G24-46、G48-22、G19-14和G57-41。GUS活性测定、荧光定量PCR以及烟草组织的GUS染色试验均显示,在这些突变体中hrpG的表达显著增加。Southern杂交结果显示,突变体中转座子均为单一位点的插入。插入位点分析结果显示,在G24-46、G48-22、G57-41和G19-14中转座子分别插入在minD、pilA、metB和wxoB基因中。毒性测定结果显示,这4个突变体在水稻上的毒性显著降低。这些hrpG调控子基因的鉴定为进一步解析稻黄单胞菌hrpG上游调控网络提供了新的科学线索。
- 王淼啸刘之洋董启超邹丽芳陈功友
- 关键词：水稻白叶枯病菌基因调控HRP基因
