刘永波
- 作品数：3 被引量：31H指数：3
- 供职机构：大连水产学院水产与生命学院农业部海水增养殖重点实验室更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡抗迟缓爱德华氏菌卵黄抗体的应用研究被引量：10
- 2006年
- 从全身出血合并腹水的养殖大菱鲆Scophthalmus maximus体内分离出1株细菌,经感染试验证实其病原性,并鉴定该菌为迟缓爱德华氏菌Edwardsiella tarda。采用该菌制成全菌油乳性灭活疫苗,分4次给蛋鸡进行免疫注射,第2次加强免疫后开始收集鸡蛋,制备卵黄抗体(IgY)和其水溶性组分(W SF),并用试管凝集法测定其效价。取效价达到1∶64的鸡蛋提取卵黄抗体,分别采用口服和腹腔注射两种方式给大菱鲆进行免疫:配成含W SF 1 mL/g的饵料,给鱼连续投喂15 d;用含蛋白含量0.19 mg/mL的纯化IgY,于第1、3、14 d对大菱鲆进行腹腔注射,剂量为0.1 mL尾/。免疫后分别用注射和划伤浸泡两种方法攻毒。结果表明,口服特异性卵黄抗体对大菱鲆的免疫保护率分别为83.3%和100%,而注射免疫没有保护作用。
- 王斌刘永波刘双凤丁鉴峰孙岑范薇
- 关键词：大菱鲆迟缓爱德华氏菌卵黄抗体
- 用两种ELISA方法快速检测大菱鲆细菌性出血性败血症的病原菌被引量：8
- 2008年
- 以大菱鲆Scophthalmus maxinzoa出血性败血症病原菌迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tarda为抗原，从免疫家兔体内获得高免疫血清，建立快速检测大菱鲆出血性败血症病原迟钝爱德华氏菌的间接ELISA技术。采用棋盘滴定法确定间接ELISA抗原和抗血清的最适工作浓度分别为10^7个／mL和1：20000；最低检测菌浓度为10^4个／mL；抗血清与其他细菌标准菌株的交叉反应结果均为阴性，表明该方法具有较高的特异性。将该方法优化后检测了19尾人工感染出血性败血症并发病的大菱鲆和19尾健康的大菱鲆，阳性检测率分别为89．5％和的10．5％。同时在间接ELISA方法的基础上建立竞争ELISA检测技术，结果表明：理想的包被抗原浓度为10^7个／mL，兔抗血清的工作浓度为1：20000，酶标抗体工作浓度为1：1000，可测最适范围为2×10^5～2×10^8个／mL，最低检测菌浓度为2×10^5个／mL，得到回归方程y=-0．3811x＋2．2335，R^2=0．992。
- 王斌范薇李艳丁鉴锋孙岑刘永波
- 关键词：迟钝爱德华氏菌
- 养殖大菱鲆出血性败血症病原菌致病性的研究及鉴定被引量：13
- 2006年
- 从全身弥漫性出血合并腹水的养殖大菱鲆Scophthalmus maximus的腹水、肝脏和肾脏中分离到3株菌落形态相同的优势菌，编号为L-49231、L-59231、L-59232。选用L-49231菌，通过注射、浸泡和灌喂3种途径分别对两种规格（全长（12±2）cm，体重（30±2）g；全长（18±2）cm，体重（125±5）g）的养殖大菱鲆进行人工感染试验，结果证实：此菌可经上述3种途径造成该病的发生，注射和浸泡方式的感染率均为100％，死亡率分别为100％和66．7％；灌喂方式未见死亡，感染率为85．7％。该菌经革兰氏染色为阴性，杆状，大小为2～3μm×1～1．2μm，周生鞭毛，兼性厌氧，接触酶为阳性，氧化酶为阴性，V．P试验为阴性。根据《常见细菌系统鉴定手册》所描述的爱德华氏菌属的生理生化特性，菌株L-49231为迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tarda。
- 王斌孙岑范薇刘双凤刘永波孙彦珂
- 关键词：大菱鲆细菌鉴定迟钝爱德华氏菌
