叶煜
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 供职机构：华南农业大学兽医学院农业部动物疫病防控重点开放实验室更多>>
- 发文基金：广东省博士启动基金国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 双表达H9N2禽流感病毒HA基因的假型重组杆状病毒系统的构建
- 2011年
- 以含有H9N2禽流感病毒HA基因的重组质粒pMD18-H9HA为模板,扩增HA基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将含有H9HA及gp64的基因片段克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA-H9-HA.然后将含有CMV启动子、H9HA及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBac-G,得到重组质粒pFastBac-G-H9-HA.将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,得到重组穿梭载体Bacm id-G-H9-HA.利用脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-Dual-H9-HA.间接免疫荧光实验表明,该重组杆状病毒可以转导哺乳动物细胞并表达HA蛋白.免疫电镜观察结果表明,HA蛋白可以在该重组杆状病毒表面展示.
- 林文耀樊惠英程晓亮陈筱薇叶煜廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型HA基因
- 表面展示猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒的构建
- 2011年
- 利用PCR方法扩增猪圆环病毒2型核定位信号区缺失的Cap蛋白基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1的gp64信号肽和gp64成熟蛋白之间.将此融合片段亚克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA3.1-gp64-dCap.然后将含有CMV启动子,gp64及dCap的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBac-V,得到重组质粒pFastBac-dCap-V.然后将此转化DH10Bac感受态细胞,获得的重组穿梭质粒Bacmid-dCap-V,经脂质体转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒Ac-dCap-V.该重组病毒感染Sf9细胞后可以产生典型的细胞病变,转导哺乳动物细胞后经间接免疫荧光试验证明,该重组杆状病毒成功转导哺乳动物细胞并表达dCap蛋白.
- 程晓亮林文耀叶煜陈筱薇严常燕廖明樊惠英
- 关键词：猪圆环病毒2型
