李佳怡
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- 登革病毒感染树突状细胞的分子机制研究进展
- 2010年
- 李佳怡左丽孙汭
- 关键词：登革病毒感染树突状细胞分子机制登革休克综合征亚热带地区伊蚊传播
- 临床分离2型登革病毒突变株E蛋白N端158氨基酸基序免疫原性初探
- 2010年
- 目的:Ⅱ型登革病毒临床分离突变株(B株)E基因区部分序列的原核表达载体构建,蛋白表达、复性和纯化,及其免疫原性的初探。方法:将B株E基因1～476bp序列克隆入原核表达载体pET28a(+),经酶切、测序鉴定正确后转入表达菌,IPTG诱导后将包涵体变性,复性,纯化后的蛋白免疫C57BL/6和BALB/c小鼠制备多克隆抗体,并通过Western blot和ELISA进行抗体鉴定。结果:成功构建了pET28a(+)-B-E原核表达载体,在表达菌中以包涵体形式稳定高表达,分子量为20kD。利用蛋白的His标签进行Western blot鉴定确定该蛋白为重组B-E蛋白,得到的可溶蛋白纯度大于90%。B-E蛋白免疫BALB/c和C57BL/6小鼠均可以得到有效的多克隆抗体。结论:B-E蛋白对BALB/c和C57BL/6小鼠具有免疫原性,其中ELISA鉴定免疫C57BL/6小鼠抗体的滴度为1∶12800,Western blot鉴定免疫BALB/c小鼠抗体滴度为1∶500。
- 李佳怡商正玲左丽
- 关键词：登革病毒包膜蛋白蛋白表达纯化免疫原性
