祁芳
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 表达鸡毒支原体TM1蛋白基因重组新城疫病毒的构建及其免疫原性研究被引量：5
- 2013年
- 为研制安全、有效的新型鸡毒支原体(MG)疫苗,本研究利用新城疫病毒(NDV)LaSota弱毒疫苗株反向遗传操作系统,构建出表达MG TM1蛋白的重组病毒rLa-TM1,并对其生物学特性进行鉴定,评估其作为MG活载体疫苗的安全性和有效性。通过免疫荧光试验表明TM1蛋白获得正确表达;经测定,重组病毒平均鸡胚致死时间(MDT)为132 h,脑内致死指数(ICPI)和静脉内致病指数(IVPI)均为0,保持了LaSota亲本株的低致病性;rLa-TM1接种鸡胚所收集尿囊液中的病毒滴度可高达每毫升109.5EID50以上,证明重组病毒保持了LaSota亲本株高滴度鸡胚生长特性;重组病毒rLa-TM1接种1周龄的雏鸡后,可以诱导显著的MG抗体反应;攻毒保护试验证明其保护率可以达90%,而对照组全部发病(10/10)。本研究表明重组病毒rLa-TM1可以作为MG重组病毒活载体疫苗的候选疫苗。
- 冯秋霖刘茂军祁芳陈曦邵国青葛金英步志高
- 关键词：鸡毒支原体重组新城疫病毒
- 鸡传染性支气管炎M41毒株S1基因的原核表达及间接ELISA抗体检测方法初步建立被引量：2
- 2012年
- 为获得鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41株的全长S1蛋白,并以S1蛋白为包被抗原建立间接ELISA抗体检测方法,试验采用RT-PCR方法扩增出S1基因,将其克隆到pBluescriptⅡKS(+)载体中,酶切、测序鉴定后将S1基因导入融合表达载体pMAL-c2X中,将重组质粒转化大肠杆菌TB1,IPTG诱导后,应用SDS-PAGE及Western-blot检测蛋白表达情况。结果表明:融合蛋白得到了表达;以纯化的重组蛋白作为包被抗原,在包被量为3.2μg/孔、血清160倍稀释条件下P/N值最大,初步建立了IBV抗体间接ELISA检测方法。
- 王建忠刘风波李晓艳田美杰冯秋霖祁芳任家琰
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒S1基因原核表达
