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胡焱: 作品数：17 被引量：45H指数：4; 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>; 发文基金：贵州省科学技术基金国家自然科学基金贵州省科技计划项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>

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鸡importin β1基因的克隆及生物信息学分析被引量：3: 2016年; [目的]对鸡importin β1基因进行克隆和生物信息学分析。[方法]根据Gen Bank公布的鸡importin β1基因序列(XM_015299473)设计合成特异性引物,通过RT-PCR从DF-1细胞中扩增importin β1基因CDS区并进行克隆和测序,利用生物信息学工具对其理化性质、二级结构和系统进化树进行分析。[结果]鸡importin β1基因CDS全长2 268bp,共编码755个氨基酸,该蛋白等电点为4.61,相对分子质量84.15 k Da,分子式为C3712H5901N979O1152S46。蛋白质二级结构预测显示,鸡importin β1蛋白含有丰富的二级结构,以α-螺旋为主(占64.90%)。importin β1基因同源性及系统进化树分析结果表明鸡与鹌鹑的亲缘关系最近。[结论]鸡importin β1基因的克隆和生物信息学分析为进一步研究其功能奠定了基础。; 胡焱段志强嵇辛勤阮涌赵佳福雷云万彪; 关键词：克隆生物信息学

鸡importin β1基因原核表达载体的构建与表达: 1引言Importin β1蛋白属于核质转运受体蛋白importin β家族成员之一,它是一种相对保守的、广泛分布于真核生物细胞内的核转运受体蛋白.早期的研究证实靶蛋白入核转运需要importin o和importinβ...; 胡焱段志强嵇辛勤阮涌赵佳福万彪邓珊珊; 关键词：原核表达载体

犬乳腺肿瘤病理组织学观察及ER PR C-erbB-2的表达分析: 2017年; 通过对20例犬乳腺肿瘤进行病理组织学观察、免疫组织化学染色,探讨犬乳腺肿瘤病理形态学特点,ER、PR、Cerb B-2表达与乳腺肿瘤的关系。结果显示,20例犬乳腺肿瘤,70%为恶性肿瘤,其中良性肿瘤有导管内乳头状瘤和纤维性瘤,恶性肿瘤有浸润性导管癌,单纯癌,小叶原位癌,癌肉瘤,腺癌,恶性肿瘤发病率高于良性肿瘤。免疫组化结果显示-ER、PR在良性肿瘤的表达率均高于恶性肿瘤,P<0.05,差异显著;C-erb B-2在恶性肿瘤中的表达高于良性肿瘤,P<0.05,差异显著。提示,犬乳腺肿瘤恶性肿瘤发病率较高,ER、PR、C-erb B-2对犬乳腺肿瘤发病中的诊断、治疗及预后有重要意义。; 刘廷江嵇辛勤主性阮涌王修江林聪宏陈强雷云龙丹丹胡焱万彪; 关键词：乳腺肿瘤免疫组织化学

不同新城疫疫苗对贵州三穗麻鸭的免疫效果比较: 2017年; 为探讨不同新城疫(ND)疫苗对贵州三穗麻鸭的免疫效果,选用NDⅠ系活疫苗(CS2株)、Ⅳ系灭活疫苗(La Sota株)和重组基因Ⅶ型NDV灭活疫苗(A-Ⅶ株)分别对三穗麻鸭进行免疫实验,检测疫苗最小免疫剂量、免疫鸭的抗体滴度和消长规律,以及病毒感染免疫鸭后的排毒情况。结果显示,活疫苗CS2株、灭活疫苗La Sota株、灭活疫苗A-Ⅶ株的最小免疫剂量分别为1.0 m L/只、0.5 m L/只和0.2 m L/只;3种疫苗2次免疫要高于1次免疫产生的抗体滴度,但各免疫组不同免疫次数鸭的抗体滴度均在第60天达到高峰,其中以灭活疫苗A-Ⅶ株1次或2次免疫诱发的抗体滴度最高(分别为7.5log2和8.1log2),并且抗体持续期长,在免疫后第150天抗体水平仍能达到免疫保护要求;对免疫鸭的排毒检测发现,活疫苗CS2株免疫后的鸭持续排毒,灭活疫苗La Sota株免疫后的鸭排毒量少且时间短,而灭活疫苗A-Ⅶ株免疫后的鸭未检测到排毒。试验结果表明,重组基因Ⅶ型NDV灭活疫苗(A-Ⅶ株)在免疫剂量、免疫次数、免疫鸭的抗体滴度和持续时间,以及抑制免疫鸭排毒方面均明显优于传统ND疫苗。; 胡焱嵇辛勤阮涌赵佳福雷云段志强刘秀梵; 关键词：新城疫病毒新城疫疫苗免疫效果

鸭疫里默氏杆菌贵州分离株OmpA及16S rRNA基因序列分析被引量：3: 2016年; 为了解鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）贵州分离株外膜蛋白A（Omp A）和16 S r RNA基因序列的相关性以及与RA血清型之间的关系,对12株RA贵州分离株通过PCR分别扩增Omp A和16 S r RNA基因,并对其构建系统进化树和分析其系统进化关系。结果显示,12株RA分离株Omp A基因分为2个群,其核苷酸和氨基酸序列同源性分别为96.9%-100.0%和98.4%-100.0%;Omp A蛋白中有规律的变异位点为100（R/G）、143（S/P）、145（T/I）和268（S/P）。12株RA分离株16 S r RNA基因同属1个群,其核苷酸序列同源性为99.4%-100.0%。结果表明,12株RA贵州分离株Omp A基因和16 S r RNA基因序列所属的基因群无明显相关性,并且与RA血清型的分型也无直接关联。; 雷云嵇辛勤段志强阮涌万香萍陈强万彪胡焱龙丹丹; 关键词：鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白A

鸭源新城疫病毒M蛋白核定位信号突变影响病毒的毒力和复制能力被引量：3: 2018年; 【目的】研究鸭源新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)M蛋白核定位信号(nuclear localization signal,NLS)突变对其毒力和复制能力的影响。【方法】利用鸭源NDV SS1株P基因和F基因上的AgeⅠ和Bstz17Ⅰ酶切位点,将overlapPCR方法获得的M蛋白NLS突变的片段替换到p NDV/SS1GFP中获得全长质粒pNDV/SS1GFP-M/NLSm。通过反向遗传学技术拯救M蛋白NLS突变体病毒,并对拯救的病毒进行血凝(hemagglutination,HA)试验、荧光试验和M基因测序鉴定。另外,对突变体病毒进行M蛋白的亚细胞定位观察,以及病毒的生物学特性、空斑形成能力和体外增殖能力测定。【结果】成功构建M蛋白NLS突变的全长质粒pNDV/SS1GFP-M/NLSm。细胞转染物接种鸡胚后的第1代尿囊液无HA效价,盲传3代才能检测到拯救病毒的HA效价。进一步的荧光试验和M基因测序确定拯救的病毒是突变体病毒r SS1GFP-M/NLSm。与亲本病毒rSS1GFP相比,突变体病毒M蛋白由细胞核定位变为细胞质定位。此外,突变体病毒的毒力、在鸡胚上的复制能力以及在细胞中的空斑形成能力显著降低,并且感染细胞后产生的细胞病变轻微,M蛋白和绿色荧光蛋白的表达量均降低,说明M蛋白NLS突变使病毒的体外增殖能力受到抑制。【结论】NLS突变导致的M蛋白细胞核定位功能丧失可明显降低鸭源NDV的毒力和复制能力。; 段志强嵇辛勤邓珊珊胡焱赵佳福倪萌萌; 关键词：新城疫病毒 M蛋白核定位信号病毒复制

鸡基质蛋白3基因的生物信息学分析被引量：3: 2017年; 根据GenBank已发表的鸡基质蛋白3(matrin 3)基因序列,设计合成一对特异性引物,以鸡胚成纤维细胞提取的总RNA反转录产物为模板,通过PCR扩增鸡matrin 3基因并进行克隆与生物信息学分析。测序结果表明:鸡matrin 3基因编码区全长为2 709 bp,共编码902个氨基酸,理论pI为5.79,分子质量约为100.71 ku,分子式为C_(4362)H_(6903)N_(1267)O_(1418)S_(29)。序列分析结果显示:鸡matrin 3蛋白有丰富的二级结构,以无规则卷曲和α-螺旋为主;该蛋白中包含两个锌指结构域和两个RNA识别基序,其中人、小鼠和野猪的4个功能结构域氨基酸位点相同,而在鸡matrin 3蛋白中存在多个氨基酸位点变异。核苷酸同源性及遗传进化分析发现:鸡与火鸡的matrin 3基因核苷酸同源性最高(为98.0%),并且与火鸡的亲缘关系最近。研究结果为进一步研究鸡matrin 3蛋白的生物学功能奠定了基础。; 邓珊珊嵇辛勤段志强熊建民阮涌赵佳福胡焱田宇杰; 关键词：克隆

贵阳地区犬细小病毒VP2基因的克隆及遗传进化分析被引量：9: 2017年; 为研究贵阳地区犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的流行基因型及其遗传进化情况,本试验对从贵阳市分离的10株CPV的VP2基因进行PCR扩增和克隆并进行序列分析。结果显示,分离的病毒能使F81猫肾细胞产生明显的细胞病变(CPE),分离的10株病毒中,7株为CPV-2a亚型,3株为CPV-2c亚型,命名为GY-1~GY-10。10株CPV分离株与疫苗株VP2基因的同源性98.4%~99.4%,与其他国内外参考株的同源性为97.7%~99.9%。本试验首次报道贵阳市CPV的流行基因型为CPV-2a亚型并伴随CPV-2c亚型存在,对监测CPV遗传变异趋势及疫苗的研制具有重要意义。; 陈强嵇辛勤段志强阮涌雷云龙丹丹胡焱万彪; 关键词：犬细小病毒基因型 VP2基因遗传进化

Importin β1介导的病毒蛋白入核转运在病毒复制中作用的研究进展被引量：4: 2017年; 核转运受体蛋白importinβ1是输入蛋白importinβ家族重要成员之一,它是一种相对保守的、广泛分布于真核生物细胞内的核转运受体蛋白。许多研究表明,importinβ1能直接识别和结合含有不同类型核定位信号的病毒蛋白并转运其入核,此过程对病毒的整个复制和致病进程起着十分重要的作用。该文主要从importinβ1的结构特征、介导的病毒蛋白入核转运机制以及在病毒复制中的作用、药物阻断importinβ1参与的病毒复制等研究方面进行综述,以期为后续研究病毒蛋白细胞核定位的分子机制和功能以及抗病毒治疗提供参考。; 胡焱熊建民赵佳福嵇辛勤段志强; 关键词：病毒复制

犬IFN-β的克隆及其序列分析被引量：2: 2019年; 为了分析犬干扰素β(IFN-β)基因分子特征,预测其编码蛋白质的生物学功能,根据GenBank登录的犬IFN-β基因序列(FJ194477)设计合成特异性引物,通过PCR从外周血淋巴细胞总DNA中扩增IFN-β基因CDS区并克隆,应用生物信息学方法对犬IFN-β基因进行序列分析,并对其理化性质以及编码蛋白的二级结构、三级结构进行预测,构建分子系统进化树。结果表明:犬IFN-β基因编码区全长561 bp,共编码186个氨基酸,其分子式可表示为C_(1014)H_(1593)N_(263)O_(290)S_9,分子质量为22.40 ku;属于亲水性蛋白,理论等电点为5.98;含有丰富的二级结构,以α-螺旋(76.88%)和无规则卷曲(19.35%)为主,蛋白三级结构呈弯曲螺旋结构;与貉、威德尔海豹、金钱豹、家猫、宽吻海豚、人、鸡和绿头鸭相对应序列核苷酸序列同源性分别为98.4%、87.2%、85.2%、84.7%、79.0%、74.9%、43.9%和43.3%。说明犬与貉IFN-β核苷酸同源性最高,亲缘关系最近。; 黄梦秋嵇辛勤段志强李世静阮涌万彪胡焱邓珊珊龙丹丹田宇杰; 关键词：干扰素-Β 扩增克隆生物信息学

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