艾思
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：武汉轻工大学更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 波形蛋白的警报素功能鉴定被引量：2
- 2016年
- 目的:鉴定胞外可溶性波形蛋白(Vim)促进相关细胞增殖、活化、趋化的能力。方法:体外检测Vim刺激大鼠脾细胞的增殖情况。体内检测Vim免疫小鼠的外周血淋巴细胞数及Vim抗体水平。收集小鼠腹腔巨噬细胞与不同浓度Vim共培养,检测其对巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响。以Transwell小室法检测Vim对NIH3T3成纤维细胞的趋化作用。结果:体外实验Vim剂量依赖性地促进大鼠脾细胞增殖,16μg/ml浓度的Vim刺激预致敏或未致敏脾细胞增殖率分别高达(196.0±9.7)%、(208.9±4.6)%,且该二者无显著性差异。体内实验单用Vim免疫小鼠的外周血淋巴细胞浓度(10~9L^(-1))激增(5.74±0.51 vs.1.69±0.13),同时激发了Vim特异性抗体水平(OD值2.31±0.06 vs.0.19±0.08);且与Vim辅以佐剂免疫小鼠的相应指标均无显著性差异。体外实验Vim浓度依赖性地促进巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力,并能够对NIH3T3成纤维细胞产生趋化作用。结论:胞外可溶性Vim非特异性促进炎症反应相关细胞增殖、活化、趋化,具有警报素功能。
- 陈卓夏昶余兰艾思方成
- 关键词：波形蛋白增殖活化趋化
- 猪源可溶性波形蛋白的提取纯化
- 2016年
- 建立从猪眼晶状体中提取和一次过柱分离纯化波形蛋白(Vim)的工艺方法。以精提液溶解猪眼晶状体粗提粉,使用单因素实验及响应面分析对精提温度、时间、料液比、p H值四个因素进行优化,利用DEAE Sepharose FF阴离子交换柱分离纯化目标蛋白,以免疫印迹法鉴定波形蛋白,10%SDS-PAGE检测纯化Vim的纯度和相对回收率。精提的最佳工艺条件为:温度13.16℃,时间26.01 min,料液比1∶34(g∶m L),p H7.03。使用DEAE Sepharose FF柱以不少于40倍柱体积的36 mmol/L Na H2PO4缓冲液洗脱后,以100倍柱体积的36—86 mmol/L Na H2PO4缓冲液一次线性洗脱分离Vim。经10%SDS-PAGE结合Image Lab 4.0分析软件检测纯化制得的冻干粉中Vim蛋白纯度达(80.66±1.30)%,相对回收率为(36.56±0.96)%。
- 陈卓夏昶艾思余兰方成
- 关键词：波形蛋白纯化
