邓伟科
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划公益性行业科研专项国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 菠萝叶纤维脱胶工程菌的构建及其表达分析
- 邓伟科
- 关键词：木聚糖酶果胶裂解酶
- 果胶裂解酶基因PelC表达载体的构建及原核表达分析被引量：2
- 2009年
- 从实验室分离保存的1株产果胶酶的菌株(BTC105)中克隆果胶裂解酶基因(PelC)完整开放阅读框,通过载体构建,将目的基因连接到表达载体pET28a上,转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行融合表达,在LB(Luria-Bertani)中进行摇瓶发酵,1 mmol/L IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导。结果表明,构建了表达载体pET28a-pelC,果胶裂解酶主要在胞内表达,酶活最适pH为5.4,最适温度为50℃,Ca^(2+)对酶活促进作用最为明显,Cu^(2+)完全抑制了酶的活性。
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- 关键词：果胶裂解酶金属离子
- 果胶裂解酶PelC基因在原核和真核细胞中的表达被引量：2
- 2010年
- 对原核E.coliBL21(DE3)-pET28a-PelC和真核GS115-pPIC9K-PelC工程菌的表达效果进行初步研究。结果表明:原核E.coliBL21(DE3)-pET28a-PelC工程菌表达果胶裂解酶,分子量约44ku;诱导表达19h后,果胶裂解酶活性在温度50℃、pH值5.4时,达到峰值,胞内表达酶活为24.01U/mL。真核GS115-pPIC9K-PelC工程菌分泌表达果胶裂解酶,分子量为43ku;诱导表达60h后,果胶裂解酶活性在温度50℃、最适pH值5.4时达到峰值,活力最高为14.2U/mL。两种表达系统的酶活比较,为以酶法脱胶方式改进传统酸碱脱胶工艺,推动绿色菠萝叶麻纺织产业打下基础。
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- 关键词：果胶裂解酶大肠杆菌BL21(DE3)
- 果胶裂解酶、木聚糖酶及果胶裂解酶、木聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达被引量：5
- 2010年
- 运用RT-PCR技术,从绿色木霉(AS3.3711)mRNA中扩增出木聚糖酶基因xyn2,并与质粒pPIC9K相连,构建了表达载体pPIC9K-xyn2,转化毕赤酵母GS115,并且将pPIC9K-xyn2和pPIC9K-PelC(果胶裂解酶)同时转化毕赤酵母GS115,通过组氨酸营养缺陷型筛选,G418高拷贝菌株筛选,以及摇瓶诱导表达筛选,分别得到一株高表达木聚糖酶毕赤酵母菌株X5和一株同时高表达木聚糖酶和果胶裂解酶毕赤酵母菌株PX6。同时,将一株高表达果胶裂解酶毕赤酵母菌株P2保存。重组酶酶学性质分析表明,P2和PX6分泌果胶裂解酶,X5和PX6分泌木聚糖酶最适温度均为50℃;P2分泌果胶裂解酶最适pH5.4,最大酶活为14.2U/mL;X5分泌木聚糖酶最适pH6.0,最大酶活为5.8U/mL;PX6分泌果胶裂解酶最适pH5.4,最大酶活为12.6U/mL,分泌木聚糖酶最适pH6.0,最大酶活为4.2U/mL。
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- 关键词：果胶裂解酶木聚糖酶毕赤酵母
- 一株菠萝叶纤维脱胶菌产果胶酶的相关性质研究被引量：5
- 2009年
- 对分离保存的1株能分解果胶的菌株进行发酵罐发酵和摇瓶培养,并用DNS法测定了果胶酶活力及分析了影响该酶活力的相关因素。结果表明,用发酵罐发酵的果胶酶活力在接种后10 h出现最大值,而摇瓶发酵的果胶酶活力峰值出现在接种后11 h,果胶酶活力作用的最适温度为45℃、pH值为5.0,金属离子Fe2+对酶活力有明显的激活作用,而Li+、Zn2+对酶活力有强烈的抑制作用。
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- 关键词：果胶酶发酵酶活力菠萝叶纤维脱胶菌
