陈亨利 作品数:9 被引量:35 H指数:3 供职机构: 吉林农业大学动物科学技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 吉林省重大科技攻关项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 更多>>
气单胞菌外膜蛋白基因工程疫苗的研究进展 被引量:2 2014年 就气单胞菌外膜蛋白的基因工程亚单位疫苗、DNA疫苗、重组活载体疫苗等基因工程疫苗的研究现状、免疫方式以及不足之处进行了综述,以期为气单胞菌疫苗研制提供参考。 单晓枫 曹亮 沈锦玉 陈龙 康元环 陈亨利 钱爱东关键词:气单胞菌 外膜蛋白 基因工程疫苗 维氏气单胞菌TH0426株外膜蛋白lamB基因的原核表达及其免疫原性分析 被引量:5 2017年 为研究维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)的免疫原性,本试验对A.veronii的lamB基因进行了克隆,构建了原核表达质粒pET-30a(+)-lamB,并转化大肠杆菌BL21(DE3),将其表达后纯化重组蛋白Maltoporin,利用SDS-PAGE和Western blot进行分析鉴定。将灭活菌体+弗氏佐剂、纯化的Maltoporin蛋白、Maltoporin蛋白+弗氏佐剂及PBS分别免疫鲤鱼后,检测每周各试验组鱼体血清的免疫指标:酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活力以及IgM抗体水平变化情况,并于加强免疫2周后对鲤鱼进行攻毒保护性试验。结果显示:重组蛋白Maltoporin免疫鲤鱼后能产生明显的免疫反应,保护率在84.2%以上;免疫后鲤鱼血清中IgM抗体水平、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及超氧化物歧化酶活力较对照组有显著提高。结果表明,重组蛋白Maltoporin具有较好的免疫原性和保护作用,为进一步研究A.veronii外膜蛋白基因工程疫苗奠定一定的基础。 康元环 陈亨利 张冬星 张海月 安鼎杰 田佳鑫 贾俊鹏 孙武文 单晓枫 钱爱东关键词:维氏气单胞菌 原核表达 免疫原性 水环境中致病微生物活的非可培养状态研究进展 被引量:3 2015年 细菌的"活的非可培养状态(VBNC)"是指细菌在不良环境下形成的一种特殊状态。常规检测方法不能检测出此状态下的细菌,给食品安全、公共卫生带来了隐患。现已发现的VBNC状态细菌大多数是水生细菌,包括很多种致病菌。现对近些年水环境中致病微生物VBNC状态的形成与检测、生物学特性及复苏的研究现状进行综述,希望能够对VBNC状态水生致病微生物引起疾病的防治起到积极作用。 陈亨利 陈龙 康元环 莫金龙 单晓枫 李影关键词:生物学特性 维氏气单胞菌JLL-1株外膜蛋白的原核表达及其免疫原性检测 2017年 为研究维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)的免疫原性,本试验对A.veronii的OmpAⅠ基因进行克隆,构建了原核表达质粒pET-30a(+)-OmpAⅠ,并转入大肠杆菌BL21(DE3),将其表达后纯化重组蛋白,利用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定。将灭活苗、弗氏佐剂(OmpAⅠ)、纯化蛋白及PBS缓冲液分别免疫鲤鱼后,检测每周各试验组鱼体血清非特异性免疫指标(酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活力)及特异性IgM抗体水平变化情况,并于加强免疫2周后对鲤鱼进行攻毒保护性试验。结果显示:重组蛋白免疫鲤鱼后能产生明显的免疫反应,保护率在77%以上;受免鲤鱼血清中IgM抗体水平、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶及超氧化物歧化酶活力活力较对照组有显著提高。结果表明,重组蛋白OmpAⅠ具有较好的免疫原性和保护作用,为进一步研究外膜蛋白基因工程疫苗的开发奠定基础。 张冬星 康元环 陈亨利 张海月 田佳鑫 单晓枫 钱爱东关键词:原核表达 免疫原性 蓝曼龙鱼致病性维氏气单胞菌的分离鉴定与系统进化分析 被引量:2 2016年 从患病蓝曼龙鱼(Trichogaster trichopterus)体内分离到1株细菌CC0323,经人工感染试验对蓝曼龙鱼有一定致病力。采用形态学观察,生理生化鉴定,16S r RNA序列分析,构建系统发育树等方法进行鉴定。结果分离株CC0323为革兰阴性短杆菌,具多形性,在RS琼脂上可生长,呈中等大小,表面光滑的淡黄色湿润菌落;理化特性和药敏试验结果与维氏气单胞菌基本相同;系统发育树可见CC0323与维氏气单胞菌QXL0711B进化关系最近。试验结果,证明分离株CC0323为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。 陈亨利 莫金龙 康元环 陈龙 毕建飞 张冬星 李芳芳 李影 单晓枫关键词:维氏气单胞菌 RRNA 系统发育分析 团头鲂致病性弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏试验 被引量:14 2016年 为鉴定长春市某渔场团头鲂致病菌,从患病团头鲂肝中分离到细菌JLTP-1608,经形态学观察、生理生化试验、16S r RNA和管家基因序列测定、系统发育学分析,鉴定为弗氏柠檬酸杆菌。致病性试验结果表明,分离菌JLTP-1608对团头鲂、斑马鱼和小鼠均具有致病性,且团头鲂与斑马鱼的临床症状与自然病例相似。药敏试验结果显示,分离菌JLTP-1608对头孢噻肟、呋喃妥因、丁胺卡那霉素、氟苯尼考等药物敏感。本研究为团头鲂感染弗氏柠檬酸杆菌的鉴定及治疗提供了理论依据。 张冬星 康元环 田佳鑫 陈亨利 安鼎杰 许瑞 孙武文 单晓枫 钱爱东关键词:团头鲂 药敏试验 RRNA 锦鲤维氏气单胞菌JLL-1株的部分生物学特性研究 2015年 为了研究JLL-1菌株的部分生物学特性,试验采用平板计数法测定其生长曲线,划线培养法观察该菌在不同培养基中的培养特性,生化反应管及相关培养基检测其理化特性,纸片扩散法测定其耐药性以及通过控制不同的培养条件检测不同培养温度、pH值及渗透压对其生长的影响。结果表明:菌株JLL-1在LB培养基中存在二次生长现象;可在麦康凯培养基、BS培养基、RS培养基、SS培养基、TSA培养基、HE培养基及营养肉汤中生长良好;该菌对青霉素、多黏菌素B、氨苄西林及克林霉素完全耐药,占测定药物的16.67%,但敏感药物可达到66.67%;该菌耐受性较强,可在25~42℃、pH值为6~10、NaCl含量为0~4%的环境中生长。说明该菌可在不同培养基上生长,并且有较强的环境适应性,可根据药物敏感试验结果指导临床用药。 莫金龙 周宇 陈亨利 康元环 陈龙 毕建飞 钱爱东 李影 单晓枫关键词:锦鲤 维氏气单胞菌 生物学特性 药敏试验 理化特性 1株人兽鱼共患病原菌嗜水气单胞菌的分离鉴定 被引量:2 2016年 为了对长春市某养鱼场病死鱼致病菌进行分离鉴定,对分离菌株进行了生物学特性分析,16S rRNA和3种管家基因的序列测定与分析,并对其进行鲤鱼、昆明系小鼠致病性试验及药敏试验。结果显示,该细菌为革兰阴性杆菌,培养特性、理化反应与嗜水气单胞菌基本相同;对左氧氟沙星、卡那霉素等18种抗菌药物敏感,万古霉素、苯唑西林等4种抗菌药物耐药;16S rRNA和dnaJ、rpoD、gyrB管家基因的均与Gen Bank上的嗜水气单胞菌相应基因有较高的同源性,同源性最高分别为99.6%、97.9%、99.9%。分离菌株对鲤鱼、昆明系小鼠有较强的致病作用,其半数致死量分别为6.76×10-7CFU/只、1.39×10-6CFU/只,表明该菌可能是1株人兽鱼共患病原菌。 毕建飞 康元环 陈亨利 张海月 张冬星 姜剑峰 单晓枫 钱爱东关键词:嗜水气单胞菌 管家基因 系统发育分析 药敏试验 维氏气单胞菌灭活疫苗的制备及对锦鲤免疫效果评价 被引量:7 2016年 为证明维氏气单胞菌灭活疫苗对锦鲤机体的免疫效果,应用福尔马林灭活法制备了维氏气单胞菌灭活疫苗对免疫后的锦鲤进行酸性磷酸酶活力检测、超氧化物歧化酶活力检测、吞噬活力等各项免疫指标的检测,并于试验第5周进行免疫保护力试验。结果显示,酸性磷酸酶活力在试验开始后有所上升,在第2周达到最高;超氧化物歧化酶活力上升,并在第2周达到最高;经观察,第3周开始白细胞的数量增多,吞噬活性同时增大;抗体效价于第3周达到最大值,并持续一段时间;免疫4周后攻菌检测免疫保护力,测得试验组的相对免疫保护率RPS为86.4%。上述结果表明,维氏气单胞菌灭活疫苗能够诱导锦鲤机体产生免疫应答反应,并能形成一定保护力。 陈亨利 莫金龙 康元环 陈龙 毕建飞 张冬星 李芳芳 李影 单晓枫关键词:维氏气单胞菌 灭活疫苗 锦鲤 免疫效果