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SIRT1过表达慢病毒稳转细胞系的构建及其对脂肪合成的影响被引量：1: 2014年; 目的:通过油红O及BODIPY染色选取脂肪代谢理想的细胞模型,并运用高内涵仪器检测SIRT1高表达细胞系中脂肪的变化。方法:在L-02、HepG2、Huh7细胞中进行油红O和BODIPY染色,观察在不同油酸浓度下脂滴的生成情况;将构建成功的SIRT1过表达慢病毒载体GV166-SIRT1及空载体病毒GV166-Control感染L-02细胞,qPCR及Western-Blot检测感染细胞中SIRT1的表达水平;高内涵系统检测L-02 SIRT1和L-02 control细胞系产生的脂滴荧光强度,以确定油酸诱导的最佳浓度及最佳刺激时间。结果:通过油红O及BODIPY染色发现L-02细胞更适宜作为脂肪代谢的细胞模型;成功构建SIRT1过表达慢病毒载体GV166-SIRT1及空载体病毒GV166-Control,qPCR及Western-Blot检测显示转染病毒后SIRT1在细胞中的表达水平明显升高;在油酸刺激浓度0.4mM、诱导时间12h时,L-02 SIRT1细胞中脂滴的荧光强度明显较L-02 control为低,且这种差异达到最大化。结论:成功建立SIRT1过表达稳定转染细胞系,并证明高表达SIRT1能够抑制脂肪合成。; 马静波霍静张松丁美玲聂勇战; 关键词：BODIPY SIRT1 慢病毒

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马静波