刘欢
- 作品数：2 被引量：12H指数：2
- 供职机构：南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 阪崎肠杆菌环介导等温扩增检测方法建立被引量：5
- 2011年
- 目的针对当前国内外传统检测方法缺点,建立阪崎肠杆菌快速检测法。方法根据阪崎肠杆菌外膜蛋白(OmpA)基因,设计4条特异性引物(内、外引物各2条),建立并优化环介导等温扩增(loop-mediated isotherm alamp lification,LAMP)检测体系及反应条件,并进行LAMP反应的灵敏度、特异性实验及实际样品检测。结果 LAMP检测阪崎肠杆菌,优化后的条件选择为:Mg2+浓度6 mmol/L,dNTP浓度0.6 mmol/L,甜菜碱浓度0.8 mol/L,外引物与内引物的浓度比1∶4,扩增温度58℃60m in;细菌纯培养检测灵敏度为101cfu/mL;对11种细菌共26株菌进行LAMP扩增,仅8株阪崎肠杆菌得到阳性扩增结果,证明引物具有很高的特异性;对实际样品进行增菌检测,采用试剂盒提取DNA,从样品处理到报告结果,耗时26 h;并采用传统检测方法验证,正确性为100%。结论该方法检测阪岐肠杆菌特异性强、灵敏度高,并且操作简便、检测成本低、耗时短,有望成为快速检测阪岐肠杆菌的有效方法。
- 范宏英龙敏刘欢罗军龙北国
- 关键词：环介导等温扩增技术
