刘玉申
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：吉林大学公共卫生学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学轻工技术与工程更多>>
- 比色免疫分析法快速检测副溶血性弧菌
- 副溶血性弧菌（V. parahaemolyticus）是最常见的食源性病原体之一。人们食用受该菌污染的食品后,极易引起副溶血弧菌食物中毒。本文描述了基于免疫磁珠的高效富集和纳米模拟酶的信号放大作用对副溶血性弧菌的快速比色...
- 刘玉申赵超王娟李娟
- 关键词：副溶血性弧菌比色法
- 文献传递
- 基于荧光共振能量转移技术的快速检测CA16型手足口病病原体新方法的建立及其评价被引量：3
- 2020年
- 目的:基于荧光共振能量转移(FRET)技术建立一种柯萨奇病毒A组16型(CA16)手足口病病原体快速检测的新方法,并对检测效果进行评价,使其达到疾病爆发流行期间大样本量检测的要求。方法:采用SDS-PAGE凝胶电脉技术和蛋白浓度定量试剂盒测定CA16鸡卵黄抗体(CA16-IgY)纯度及蛋白水平,采用间接ELISA法检测抗体效价及特异性,采用紫外可见光谱(UV-Vis)、红外光谱(FTIR)和透射电子显微镜(TEM)等方法对所制备的金纳米粒子(AuNPs)及其生物探针(IgY-AuNPs)的尺寸、形貌和性能进行表征;基于FRET技术构建CA16检测体系,通过优化检测体系中IgY-AuNPs浓度、氯化钠(NaCl)用量和荧光恢复时间等指标,对检测方法的灵敏度、特异度和临床样本检测进行评价。结果:CA16-IgY纯度较高,抗体平均蛋白水平为12.15mg·L-1,抗体效价高达1∶128 000,特异性良好;AuNPs及IgY-AuNPs的UV-Vis、FTIR和TEM观察结果,IgY已成功标记至AuNPs表面,提示已通过静电自组装成功制备了可以特异性识别CA16的IgY-AuNPs。基于FRET技术构建CA16检测体系,体系经优化后,确定IgY-AuNPs的最佳浓度为0.52×10-3g·L-1,NaCl的最佳用量为40μL,荧光恢复最佳时间为90min,建立的检测方法的标准曲线为I525nm=15.452IgC-9.746,R2=0.993 2,检测限为1×104 PFU·mL-1,与临床检测金标准实时荧光定量PCR (qRT-PCR)法比较,一致率可达93.75%。结论:成功建立了CA16型手足口病病原体的快速检测新方法,可用于实验室和临床检测。
- 聂玮李娟曹晓炼代天聪郭潇潇刘玉申王娟李卓林
- 关键词：柯萨奇病毒A组16型荧光共振能量转移手足口病鸡卵黄抗体金纳米粒子
