吴君
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：湖北医药学院附属人民医院更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 细胞穿透肽CCL融合蛋白的构建与表达
- 2016年
- 目的评估细胞穿透肽CCL融合蛋白构建的可能性。方法将CCL6-PEP-6XHis构建至pABP质粒,然后提取pABP-CCL6-PEP质粒进行人胚肾HEK293细胞转染表达,以及CCL6-PEP-6XHis蛋白层析纯化和检测。结果成功构建并纯化细胞穿透肽CCL融合蛋白。将CCL6-PEP-6XHis Tag基因经PCR扩增、接入T载体、克隆、培养,并提取质粒进行测序鉴定,所得序列与目的基因一致。成功将CCL6-PEP-6XHis基因构建至哺乳动物细胞表达载体pABP中,经质粒提取和酶切鉴定,电泳结果显示,HindⅢ+XbaⅠ切出约430 bp的条带,符合预期,酶切鉴定正确。蛋白质印迹法(Western Blot)检测结果阳性,表明纯化得到的目标蛋白带有hisx6标签。结论细胞穿透肽CCL融合蛋白能够人工构建,并通过真核细胞进行表达。
- 刘勇安艳芳王仲霞杨建业吴君
- 关键词：细胞穿透肽CCL基因表达
