宋青山
- 作品数:12 被引量:17H指数:1
- 供职机构:河套学院更多>>
- 发文基金:内蒙古自治区高等学校科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生文化科学农业科学更多>>
- pEASY-E1-Int1表达载体的点突变改造与整合酶的表达分析
- 2019年
- 整合子—基因盒系统(Integron-gene cassette system)能使耐药基因在细菌种内和种间快速传播。在整合子—基因盒系统中起关键作用的是整合酶,本研究的目的在于克隆与NCBI公布的整合酶DNA序列完全一致的序列,并进一步表达纯化整合酶。采用PCR技术点突变改造pEASY-E1-Int1表达载体上的目的基因整合酶基因,共含5个突变位点,测序比对后,再连接与pEASY-E1 expression表达载体上,转化到BL21(DE3)感受态细胞中,不同浓度IPTG诱导优化表达,经聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting检测分析,结果得到表达产物分子量为33 kD与Ⅰ类整合子整合酶分子量一致的整合酶。本研究为下一步比较野生型和耐药性大肠杆菌整合酶活性提供基础指导。
- 贾芳杨江流宋青山梁艳霞王海龙
- 关键词:点突变整合酶
- 嗜盐古细菌的耐盐机制及其应用价值研究进展
- 2024年
- 嗜盐古细菌是一类主要生活在极性高盐环境中的古生菌。嗜盐古细菌及其酶具有耐高盐、耐极端pH和温度等特性,这使嗜盐古细菌来源的蛋白酶不仅成为各种生物技术产品的来源,还在生物技术中有许多潜在的应用。本文综述了嗜盐古细菌的分类、生理以及极性盐环境的适应机理,在盐环境下参与的代谢途径,进一步讨论了来源于嗜盐古细菌的各种活性蛋白酶的性质以及其在生产应用中扮演的重要角色。
- 崔云虹宋青山
- 关键词:高盐环境耐盐机理
- 细胞因子在结核早期诊断中的动力学评价
- 2019年
- 为筛选与结核病诊断、治疗效果相关的细胞因子,采用ELISA方法测定血清中的细胞因子含量,统计分析其动态变化,结果发现10个细胞因子在涂片阳性和培养阳性(S^+C^+)、涂片阴性和培养阳性(S^-C^+)、涂片阴性和培养阴性S^-C^-三组中无统计学意义(P>0.05),10个细胞因子中,每个细胞因子血清含量均值在治疗前和治疗后无统计学意义(均是P>0.05)。细胞因子在结核病人群中存在个体差异性。
- 宋青山贾芳黄海荣
- 关键词:结核病细胞因子
- 耐药性大肠杆菌整合子整合酶的克隆与表达
- 2016年
- 为获得纯化的大肠杆菌Ⅰ类整合子整合酶,采用PCR技术扩增目的基因,将目的基因克隆到pEASY-T1载体上测序,测序结果与NCBI上公布的耐药性大肠杆菌Ⅰ类整合子整合酶基因完全一致后,再将目的基因克隆到表达载体pEASY-E1 Expression上,将表达质粒载体转化于rosetta感受态细胞中诱导表达,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western-blot)检测分析。结果表明:表达产物分子量为33 ku,与耐药性大肠杆菌Ⅰ类整合子整合酶分子量一致,为进一步测定酶的活性提供物质基础。
- 贾芳杨江流宋青山
- 关键词:大肠杆菌整合子整合酶PCR
- 海藻糖对人脑型肌酸激酶热变性的保护作用被引量:1
- 2016年
- 肌酸激酶(creatine kinase,CK)是研究蛋白质折叠和稳定性的一个理想的模型蛋白。热失活研究结果显示海藻糖能有效防止人脑型肌酸激酶(human brain-type creatine kinase,hBBCK)的热失活和热变性。1.0mol/L海藻糖使hBBCK热失活的半失活温度(Tm)升高4.6℃,活化能由原来的29.7kJ/mol升高到41.1kJ/mol。内源荧光光谱研究结果显示在海藻糖浓度分别为0、0.6、0.8和1.2mol/L时,hBBCK热变性的表观转变温度(T1/2)相应的从43.0℃上升到46.5、47.7和49.9℃。内源荧光和ANS外源荧光光谱研究结果表明海藻糖的疏水作用可能对hBBCK的热稳定性起了重要作用。hBBCK复性动力学试验结果表明海藻糖能有效抑制hBBCK复性过程中聚集体的形成。
- 宋青山杨江流贾芳
- 关键词:海藻糖热变性
- 基于多组学解析布鲁氏菌BvfA对睾丸支持细胞线粒体NADH-泛醌氧化还原酶复合体的影响
- 2024年
- 【目的】明确布鲁氏菌BvfA对宿主睾丸支持细胞(TM4细胞)的损伤作用,以揭示布鲁氏菌对宿主的致病机制。【方法】利用RNA-Seq双端测序、Label-free蛋白组学技术和LC-MS非靶代谢组学技术分析感染布鲁氏菌S19△bvfA与S19菌株的TM4细胞的组学差异,采用KEGG数据库对差异表达蛋白及差异代谢物通路进行分析,并利用平行反应监测(PRM)对蛋白表达量进行验证。【结果】感染S19△bvfA和S19菌株的TM4细胞差异表达基因共400个,差异表达蛋白共422个,差异代谢产物共271种。多组学联合分析发现,S19△bvfA和S19菌株感染TM4细胞差异表达基因、差异表达蛋白和差异代谢产物共同富集的KEGG通路为内源性大麻素信号通路,在该通路中发现S19△bvfA菌株感染TM4细胞的线粒体NADH-泛醌氧化还原酶复合体(ComplexⅠ)中有20个蛋白表达量下调。PRM验证结果显示,ComplexⅠ中Ndufb11、Ndufa9、Ndufv1、Ndufv2、Ndufs8和Ndufs2蛋白的表达趋势与Label-free蛋白组学技术测定结果一致。【结论】BvfA在布鲁氏菌感染TM4细胞时能引起转录、蛋白质和代谢水平的变化,布鲁氏菌BvfA使睾丸支持细胞线粒体NADH-泛醌氧化还原酶复合体蛋白表达下调。
- 宋青山杨江流刘军贾芳
- 关键词:布鲁氏菌睾丸支持细胞
- 某医院广泛耐药结核病住院患者耐药特点及危险因素分析被引量:16
- 2019年
- 目的分析广泛耐药结核病(extensively drug-resistant tuberculosis, XDR-TB)患者对一、二线抗结核药物耐药情况及危险因素。方法收集结核分枝杆菌培阳的住院结核患者,采用分枝杆菌微孔板法药敏检测试可信区间剂盒筛出XDR-TB患者,采用Logistic回归分析XDR-TB患者一、二线抗结核药耐药危险因素。结果利福平、异烟肼和利福喷丁耐药率100%,链霉素、利福布汀、乙硫异烟肼、左氧氟沙星和卷曲霉素耐药率90~100%,卡那霉素和对氨基水杨酸耐药率70~80%,阿米卡星耐药率60~70%,丙硫异烟肼耐药率50~60%,乙胺丁醇和莫西沙星耐药率40~50%,克拉霉素耐药率10~20%,氯法齐明耐药率5.2%。XDR-TB中有92.1%的患者对10种以上抗结核药物,耐药种类最少的患者耐6种抗结核药物。Logistic回归分析XDR-TB对一、二线抗结核药物耐药的危险因素包括年龄[20~40岁为(OR=6.318, 95%CI:1.204~33.15,P=0.029;40~60岁为(OR=4.772, 95%CI:0.973~23.392,P>0.05); 60岁以上为(OR=41.366, 95%CI:2.909~588.265,P=0.006)]和抗结核治疗史为复治(OR=28.013, 95%CI:3.357~233.766,P=0.002)。结论 XDR-TB患者耐药情况严重,但有药可治,耐药种类多,其危险因素主要来源于年龄和抗结核治疗史。
- 贾芳宋青山黄海荣
- 关键词:XDR-TB耐药
- 无毒无害人体标本保存液的应用
- 2019年
- 目的:研究一种无毒无害、经济、易于配制的人体标本保存液。方法:用无毒无害的防腐试剂配制一种人体标本保存液,并与广泛使用的5%的甲醛保存液的保存效果进行对比。结果:无毒无害人体标本保存液在标本杀菌、防霉、安全、无毒害方面都有良好表现。结论:无毒无害人体标本保存液完全可以替代5%甲醛保存液进行人体标本的保存。
- 王强孟泽贾芳乔军伟张叶宋青山帖卫芳
- 关键词:人体标本保存液
- 一种生化教学实验用动物解剖手术台
- 本实用新型涉及一种生化教学实验用动物解剖手术台,包括底座,底座上设有可升降的支柱,支柱的顶端设有倾角调整装置,底座下部还设有托盘位置调整装置和可锁定的万向轮。本实用新型的操作台面的倾角可在横向和纵向两个方向上分别进行调整...
- 宋青山
- 文献传递
- 生物化学教学改革探索与实践
- 2018年
- 在生命科学和信息科学不断发展的影响下,生物化学在深度和广度两个方面所涵盖的内容也发生了相应的变化,无论是内容领域还是难度都相较于以前有了明显的增加。所以无论是教学内容还是难度的增加亦或是时代的变化都在推动着生物化学的教学改革,本文从前沿科研与案例结合提升兴趣、PBL式教学互动、思维导图式章节小结、模拟课堂式实践教学等方面对生物化学打教学模式进行了相应的调整,并且在促进师生之间相互交流、激发学生兴趣、培养学生能力方面取得了一定的成果。
- 宋青山
- 关键词:化学教学改革生物化学信息科学生命科学教学互动