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转化生长因子-β1 shRNA表达载体的构建与鉴定被引量：2: 2010年; 目的构建转化生长因子(TGF)-β1短发卡RNA(shRNA)表达载体,为肿瘤生物学研究奠定方法基础。方法根据TGF-β1的mRNA序列,运用Ambion公司的Target Finder软件筛选TGF-β1shRNA的候选点,在BglⅡ和HindⅢ位点克隆到表达载体pSUPER gfp-neo上。重组的shRNA pSUPER gfp-neo在大肠杆菌DH5a上筛选和鉴定。分别用酶联免疫吸附法(ELISA)测定和免疫荧光筛选最佳TGF-β1shRNA靶点序列。结果 ELISA和免疫荧光染色结果显示,shRNA-a、shRNA-b和shRNA-c均在不同程度上降低了靶细胞TGF-β1蛋白质表达,以shRNA-b所引起的下降最为显著(P<0.05)。结论构建的TGF-β1shRNA在肿瘤细胞中产生较好的TGF-β1沉默效果,为肿瘤生物学研究提供了一种方法。; 张彪郭凌川董亮周赟吴淳胡欣潘展腾钟良君王守立; 关键词：RNA干扰转化生长因子-Β1

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潘展腾