王仁超
- 作品数：2 被引量：10H指数：1
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 绵羊肺炎支原体P71蛋白分段表达及其间接ELISA方法的建立被引量：9
- 2015年
- 为研究绵羊肺炎支原体(MO)P71蛋白免疫学相关功能及建立MO的快速检测方法,本研究采用PCR扩增MO P71基因片段,测序后利用生物学软件分析P71蛋白的抗原表位,选取抗原表位富集的3个基因片段P71-1(1 bp^516 bp)、P71-2(505 bp^1 338 bp)和P71-3(1 327 bp^1 905 bp)分别克隆至原核表达载体p ET-32a中进行表达。分别利用western blot和间接ELISA方法对表达产物的免疫原性、反应原性进行鉴定,以筛选的优势抗原蛋白为诊断抗原,通过对反应条件的优化,建立检测MO抗体的间接ELISA方法。结果表明:重组蛋白P71-3产生的抗体效价最高,与MO阳性血清的结合能力最强,阴阳性临界值为:OD450nm值=0.292。该方法与口蹄疫、小反刍兽疫、副结核、羊布鲁菌病、结核阳性血清均无交叉反应,具有极强的特异性。组内组间变异系数均小于10%,重复性较好。利用该方法与间接血凝试验对150份临床血清样品进行检测,结果显示,两者符合率为96.67%。本研究为进一步研制MO ELISA检测试剂盒奠定了基础。
- 黄海碧郑佳琪王仁超王晓晖陈德浩王灵芮郭逸贤郝永清
- 关键词：绵羊肺炎支原体抗原性分析ELISA
- 绵羊肺炎支原体黏附因子的定点突变及原核表达被引量：1
- 2014年
- 本研究采用点突变PCR方法成功克隆并表达了绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoiae,M.O)内蒙古分离株(SZWQ株)的黏附因子基因(SZWQ-860)。表达产物经SDS-PAGE电泳检测,与预期目的蛋白的大小一致,将重组蛋白纯化后经Western blot检测,结果表明重组蛋白具有良好的免疫反应性。
- 程晨黄海碧王晓晖王仁超谢红霞郝永清
- 关键词：绵羊肺炎支原体定点突变重组蛋白
