王欣雨
- 作品数：11 被引量：26H指数：3
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学艺术更多>>
- 溶血素基因缺失对单增李斯特菌在小鼠肠道内定殖的影响被引量：1
- 2022年
- 旨在探究单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)溶血素hly、llsB基因对小鼠肠道的影响。在构建Lm的hly基因缺失株基础上,以Lm90SB2及溶血素基因缺失株Lm90SB2-Δhly、Lm90SB2-ΔllsB为试验菌,进行生长曲线、溶血活性以及器官载菌量的测定。结果:缺失株在不同条件下的生长特性与亲本株相比无明显差异;Lm90SB2、Lm90SB2-ΔllsB的溶血效价分别为1log2、2log2,而Lm90SB2-Δhly基本无溶血现象。缺失株Lm90SB2-Δhly、Lm90SB2-ΔllsB的肠道载菌量均低于亲本株Lm90SB2(P<0.05),在各个时间点肠道中的细菌定殖率依次为Lm90SB2>Lm90SB2-Δhly>Lm90SB2-ΔllsB。本研究表明,hly、llsB基因对Lm在小鼠肠道内定殖可能有直接或间接的调控作用,试验结果为进一步研究hly、llsB基因在Lm致病过程中的作用提供一定的理论依据。
- 李巧巧王欣雨潘星羽尉小军曾东东任静静蒋建军
- 关键词：单增李斯特菌小鼠
- 食源性单增李斯特菌inlA/inlB/inlC基因缺失株的构建及其生物学特性分析被引量：7
- 2019年
- 为探究内化素inlA/inlB/inlC基因对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)生物学特性的影响,本研究采用融合PCR方法构建Lm681 inlC基因缺失突变体,并构建pKSV7-△inlC穿梭载体,将其转化Lm681-△inlAB感受态细胞,利用温度(42℃)和氯霉素(10μg/mL)抗性双重压力来实现同源重组,筛选同源重组子进行鉴定并研究其部分生物学特性。结果显示,PCR和测序结果证实成功构建了3基因缺失株(Lm681-△inlABC),且缺失株的生长特性与野生株相比无明显差异,溶血特性与野生株保持一致;小鼠感染试验显示,野生株Lm681、Lm681-△inlAB和Lm681-△inlABC对小鼠的致死率分别为80%(8/10)、60%(6/10)和40%(4/10),对小鼠的LD50分别为4.36×10~4、1.35×10~6和2.95×10~7 CFU,且Lm681-△inlABC在肝脏、脾脏及脑组织中的定植能力极显著低于野生株(P<0.01)。研究结果表明,inlA/inlB/inlC基因对Lm致病性发挥具有一定的作用,为深入研究inlX基因介导Lm入侵宿主细胞过程中的作用机制提供了科学依据。
- 任静静杨铭伟陈云飞尹华王欣雨李蓓蓓蒋建军王鹏雁
- 关键词：单增李斯特菌生物学特性
- 单增李斯特菌溶血素S llsB基因缺失株的构建及部分生物学特性研究被引量：2
- 2018年
- 为分析单增李斯特菌溶血素S(listeriolysin S,LLS)llsB基因缺失对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)生物学特性的影响,本研究利用同源重组构建了llsB基因缺失株LM90-ΔllsB,并以8周龄、体重40g±5g的健康昆明系雄性小鼠为试验动物对其生长特性、半数致死量(LD50)、脏器载菌量等生物学特性进行了初步研究。结果显示,本研究成功构建了llsB基因缺失株;缺失株在体外连续培养20代过程中能稳定遗传。通过生长曲线测定发现,llsB基因缺失株生长活性略高于亲本株;小鼠感染试验结果显示,亲本株和缺失株的LD50分别为106.17和106.50 CFU;与亲本株相比,缺失株在小鼠肝脏和脾脏中的载菌量均极显著减少(P<0.01),说明缺失株对小鼠的感染能力明显减弱。在小鼠脑中未检出单增李斯特菌。综上所述,llsB基因对LM90的部分生物学特性可能有直接或间接的调控作用,本试验结果为进一步研究LLS的致病机理及防控李斯特菌病提供一定的理论依据。
- 尹华任静静王欣雨蒋建军
- 关键词：基因缺失株生物学特性
- 内化素A/B对单增李斯特菌在模拟酸性胃环境中耐受性的影响被引量：1
- 2020年
- 单核细胞增生李斯特菌(Listeria Monocytogenes,LM)是一种重要的食源性病原菌,它可以通过人口途径进入胃肠道,并穿越屏障进入肠道细胞中定殖并感染,由此可见该菌引起食物中毒的首要条件是抵抗人体内恶劣的酸性胃环境。本研究以单增李斯特菌LM90SB2及内化素基因缺失株LM90SB2ΔInlAB、LM90SB2ΔInlA、LM90SB2ΔInlB为受试菌,对4株菌进行生长曲线的测定,对其携带毒力基因溶血素(hly)扩增验证;不同pH条件下的生长曲线测定,以及模拟酸性胃环境中的耐受性研究。结果表明2~6 h 4株菌处于对数生长期,并均携带溶血素O的毒力基因hly,适宜生长的pH为6~7,pH=9时LM90SB2生长显著高于LM90SB2ΔInlAB(P<0.05)。受试菌在模拟胃环境中的存活率与其pH及作用时间相关,当pH=3.5时,4株菌的存活率依次为LM90SB2>LM90SB2ΔInlA> LM90SB2ΔInlB>LM90SB2ΔInlAB;当pH=2.5时LM90SB2生长极显著高于LM90SB2ΔInlAB(P<0.01),且随着时间的推移,4株菌生长曲线均呈下降趋势;当pH=1.5时,LM90SB2在l h、2 h时分别有0.075%及0.03%的存活率,而缺失株的存活率为0。研究表明,内化素A/B在LM抵抗人体酸性胃环境中发挥重要作用。
- 潘星羽王欣雨李红欢蒋建军
- 关键词：单增李斯特菌耐受性
- 北疆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的检测与分析被引量：2
- 2016年
- 为了解2014-2015年北疆地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抗体水平。试验从北疆的石河子、沙湾、玛纳斯、克拉玛依4个不同区域的16个规模猪场采集血液样品共计吕2吕份,采用间接ELISA法检测其抗体水平,结果发现PRRSV的平均抗体阳性率为75.36%,平均KQ值为58.12。16个猪场抗体阳性率达到70%以上的占吕1.25%,各猪场抗体水平差异极显著(P<0.01)。通过对16个不同规模猪场的血清学检测,表明北疆部分地区对PRRS的防控水平存在差异,防控力度仍需要继续提高。
- 刘功成张倩屈勇刚杨蓓王欣雨王园园李新顺
- 关键词：PRRSSA抗体检测阳性率
- 抗菌肽对三黄肉鸡大肠杆菌病的预防及效果评价
- 2016年
- 鉴于抗生素的滥用对养鸡业的危害，尤其是它给鸡场大肠杆菌病的防治工作带来越来越大的挑战。所以本试验运用抗菌肽这一新型微生态制剂预防鸡的大肠杆菌病的发生，同时用氟苯尼考和氧氟沙星这两种抗生素作为对照组，用以评价抗菌肽的效果。试验对鸡群采用3次饮水添加，通过对氧氟沙星试验组、氟苯尼考试验组和抗菌肽试验组鸡群的死亡率、料肉比的科学统计，结果抗菌肽试验组的死亡率和料肉比最低，生产性能最好。该结果表示抗菌肽对鸡群防治大肠杆菌病作用效果比抗生素更好，今后可以作为部分或完全替代抗生素的微生态制剂。
- 刘功成屈勇刚于会举张培生刘鸽王欣雨王园园张倩
- 关键词：抗菌肽三黄肉鸡死亡率料肉比
- 单增李斯特菌llsB基因克隆及序列分析被引量：2
- 2019年
- 试验旨在对新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2单增李斯特菌llsB基因进行克隆及生物信息学分析,以期进一步完善单增李斯特菌溶血素S的功能研究。根据GenBank中单增李斯特菌F2365基因全长序列(登录号为:AE017262)设计其特异性引物,利用PCR方法对新疆分离株LM90SB2的llsB基因进行扩增,回收目的基因与pMD19-T载体连接,采用PCR、双酶切鉴定筛选阳性菌并进行测序,对所获序列进行同源性比对及遗传变异分析。结果显示,新疆分离株LM90SB2的llsB基因序列全长为876 bp,共编码291个氨基酸;LM90SB2分离株llsB基因核苷酸序列与10-0809、81-0592、81-0558、02-1792、NTSN、02-1289不同分离株同源性均为100%,与CIIMS-PH-1、NRRLB-57603株的同源性均为99.9%,与J1816、R2-502株的同源性为44.7%~45.0%。分子进化树显示,LM90SB2菌株llsB基因与血清型为4b的菌株亲缘关系较近,聚类为同一分支。蛋白质二级结构预测表明,LM90SB2 llsB蛋白为亲水性蛋白,无信号肽,不形成跨膜结构。本试验成功克隆了LM90SB2株llsB基因,为深入探讨该基因功能提供全面的理论依据。
- 王欣雨尹华任静静李红欢蒋建军
- 关键词：单增李斯特菌克隆生物信息学分析
- 新疆石河子地区规模化猪场猪瘟抗体检测及分析被引量：6
- 2016年
- 为了解新疆石河子地区猪场猪瘟病毒(CSFV)抗体水平,试验从新疆石河子地区的12个不同规模猪场共采血样743份,采用间接ELISA(酶联免疫吸附试验)法检测CSFV的抗体水平。结果发现,该地区CSFV抗体平均阳性率为85.87%(638/743),免疫抗体阳性率超过80.00%的猪场占75%,各猪场抗体水平差异极显著(p<0.01)。结果表明石河子地区CSFV抗体水平较高,该结果可为新疆石河子地区猪瘟防疫工作提供一定的参考。
- 刘功成张倩屈勇刚杨蓓杨慧敏王欣雨王园园李新顺马博
- 关键词：猪瘟病毒ELISA抗体水平阳性率
- 玫瑰冠鸡冠型分子鉴定方法的研究被引量：2
- 2017年
- 为提高玫瑰冠鸡冠型的早期选种与保种效率,采用基因型分子标记法,对300只玫瑰冠表型与200只单冠表型的鸡进行基因型分子鉴定,结果检测到RR(玫瑰冠基因型纯合)、RS(表型为玫瑰冠性状而基因型为杂合)、SS(单冠基因型纯合)三种基因型。并用传统的测交方法对分子标记的结果进行效果评价,将经分子鉴定的46只已知基因型的玫瑰冠表型的公鸡分别与配对的92只SS基因型隐性纯合的单冠母鸡进行测交。F_1代的冠型结果表明,测交与分子鉴定的结果完全一致,且分子鉴定法比测交便捷,还可进行冠型基因型的早期选种,为玫瑰冠鸡冠型性状的分子选育奠定了基础。
- 张梅张苗苗王欣雨周志楠孙杰李岩张金生廖和荣
- 关键词：玫瑰冠鸡冠型基因型分子标记测交
- 石河子地区奶牛乳房炎大肠埃希菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：5
- 2016年
- 为了解引起新疆石河子地区规模化牛场奶牛乳房炎大肠埃希菌的流行情况及其耐药性,对石河子地区部分奶牛场采集85份临床型或隐性乳房炎奶样进行大肠埃希菌的分离、鉴定及耐药性试验。结果表明,从85份奶样中分离到127株细菌,其中大肠埃希菌27株,占21.26%。耐药性试验结果显示,27株大肠埃希菌全部对杆菌肽耐药,66%以上对青霉素、复方新诺明、红霉素耐药,80%以上对丁胺卡那霉素、恩诺沙星、氟苯尼考、头孢曲松、头孢哌酮5种药物敏感。调查结果为本地区奶牛乳房炎的防控提供了参考依据。
- 张倩刘功成屈勇刚赵毅杨亚东杨蓓王欣雨王园园
- 关键词：奶牛乳房炎大肠埃希菌耐药性
