王运良
- 作品数:1 被引量:7H指数:1
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- BDNF修饰神经干细胞移植对脑缺血损伤的影响被引量:7
- 2005年
- ①目的探讨脑源性神经营养因子基因(BDNF mRNA)修饰神经干细胞(NSCs)移植到大鼠脑缺血损伤处后的基因表达变化.②方法64只成年SD大鼠随机分为4组,正常对照组(A组)、手术对照组(B组)、NSCs移植组(C组)、BDNF基因修饰NSCs移植组(D组),每组16只.应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型.C、D组分别将制备好的NSCs和BDNF基因修饰NSCs细胞悬液10 μL(约6×104个细胞)用微量注射器注入损伤处,缝合皮肤.各组分别于手术后7、14、21、30 d将4只大鼠麻醉,取脑,制备组织切片,应用X-gal组化、原位杂交等方法,检测移植处细胞的标记基因表达和BDNF的表达.③结果X-gal组化染色结果显示,移植的NSCs和BDNF基因修饰NSCs均能在脑缺血区内存活,并分化成各种细胞,D组X-gal阳性细胞比C组多,且在移植7、14 d时细胞形态清晰,大部分为密集团状生长.原位杂交显示,手术后各组各时间点脑组织切片上均可见BDNF mRNA阳性细胞表达,其中D组的阳性细胞数目明显高于C组.图像分析结果显示,C组BDNFmRNA阳性细胞的平均吸光度值在移植后7~14 d时最高,以后呈逐渐下降趋势,至21 d时与B组相比差异均有显著性(F=6.27~14.35,q=4.96~7.85,P<0.01),到30 d时与B组差异无显著意义.C组与D组比较,各时间点BDNF mRNA阳性细胞的平均吸光度值差异均有显著意义(q=5.17~9.28,P<0.01).④结论BDFN基因修饰NSCs能在脑损伤移植处存活,强烈表达BDNF mRNA.BDNF mRNA修饰NSCs可以作为脑缺血损伤修复的移植材料.
- 王鲁民吴群玫尹作民郭云良王运良
- 关键词:干细胞移植脑缺血再灌注脑源性神经营养因子