赵松
- 作品数：9 被引量：31H指数：3
- 供职机构：沈阳军区总医院更多>>
- 发文基金：辽宁省科学技术计划项目国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 二甲双胍对巨核细胞白血病细胞株Dami细胞增殖的抑制作用及其机制被引量：2
- 2014年
- 目的:研究二甲双胍对巨核细胞白血病细胞株Dami细胞生长的影响,初步探讨二甲双胍抑制Dami细胞增殖的分子机制。方法:将培养的Dami细胞分为空白对照组,1、2、4、8、16和32mmol·L-1二甲双胍处理组;MTT法检测不同浓度二甲双胍作用后Dami细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期分布,免疫印迹分析Cdc2和Cyclin B1蛋白的表达以及Cdc2蛋白的磷酸化修饰。结果:MTT检测,与空白对照组比较,32mmol·L-1二甲双胍处理组0、24、48、72和96h Dami细胞增殖抑制率明显升高[(35.1±2.3)%、(49.7±5.1)%、(78.8±0.9)%、(79.1±3.0)%和(85.2±3.2)%](P<0.01);在二甲双胍处理72h后,1、2、4、8、16和32 mmol·L-1处理组Dami细胞增殖抑制率分别为(33.8±1.3)%、(51.9±2.2)%、(59.4±1.6)%、(65.5±2.0)%、(75.5±0.9%)和(79.1±3.0)%,二甲双胍对Dami细胞的增殖抑制作用呈时间和剂量依赖性。流式细胞术检测,与空白对照组比较,1、2和4mmol·L-1二甲双胍处理组G2/M期细胞比例从(26.0±0.5)%升高至(38.5±1.5)%、(48.4±1.1)%和(58.2±2.7)%,4mmol·L-1二甲双胍处理组G2/M期细胞比例明显高于对照组(P<0.01)。免疫印迹分析,与空白对照组比较,4mmol·L-1二甲双胍处理组Cdc2和Cyclin B1的表达水平明显下降,Cdc2在Try15位点磷酸化明显上调,而在Thr161位点的磷酸化明显下调。结论:二甲双胍能抑制Dami细胞增殖并诱导其发生G2/M期阻滞,其机制可能与Cdc2/Cyclin B1复合物的活化受到抑制有关。
- 李长岭蔺迪邢思宁赵松陈惠鹏周凡马东初
- 关键词：二甲双胍细胞周期
- ALOX5启动子区基因多态性与儿童哮喘易感性及白三烯受体拮抗剂药效关系研究被引量：13
- 2018年
- 目的观察ALOX5启动子区-1708 SNP及位于-176/-147的Sp1/Egr1结合位点重复序列多态性与儿童哮喘易感性、临床特征及白三烯受体拮抗剂(LTRA)药效的关系。方法选取2016年10月至2018年1月沈阳军区总医院儿科243例哮喘患儿为病例组,以同期体检的228例非哮喘儿童为对照组,应用聚合酶链反应(PCRs)、测序法对纳入对象ALOX5-1708及Sp1/Egr1结合位点基因分型,收集各项临床资料并予抗哮喘治疗,分析基因多态性与临床特征及LTRA药效关系。结果 (1)病例组Sp1/Egr1结合位点重复序列非5/5基因型频率明显高于对照组(OR=1.485,95%CI=1.018-2.167,χ2=4.225,P=0.040)。(2)中重度组G/A+A/A型及G/A型频率均高于轻度组(χ2=4.832、4.565,P=0.028、0.033),中重度组4/6型频率低于5/5型,而5/6型频率则高于5/5型(χ2=3.643、3.888,P=0.056、0.049)。结论 ALOX5 Sp1/Egr1结合位点重复序列多态性可能与儿童哮喘发病及严重程度、过敏及其家族史、LTRA效果有关;ALOX5-1708位点多态性可能与哮喘严重程度、肺功能指标及LTRA效果有关。
- 廖世峨魏兵李婉莹马明王雪娜魏克伦王欢赵松
- 关键词：基因多态性儿童哮喘白三烯受体拮抗剂
- 蛋白激酶A抑制剂H-89通过调节核糖体蛋白S6激酶1的磷酸化阻断SP600125诱导的CMK细胞多倍体化被引量：1
- 2016年
- 目的研究核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)翻译后修饰在巨核细胞倍体化调控方面的作用。方法 c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89单独或联合处理CMK原始巨核细胞白血病细胞。碘化丙啶(PI)染色,结合流式细胞术检测DNA的相对量,从而进行DNA倍体分析;Western blot法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)下游靶分子S6K1表达和磷酸化修饰(Thr389和Thr421/Ser424)的变化。使用分子对接和激酶活性检测分析H-89与S6K1结合的关系以及对激酶活性的影响。结果 SP600125以时间和剂量依赖的方式诱导CMK细胞多倍体化,同时,上调S6K1的Thr421/Ser424磷酸化和下调Thr389的磷酸化。H-89不但部分阻断SP600125诱导CMK细胞多倍体化,而且下调S6K1的Thr421/Ser424磷酸化和上调Thr389磷酸化。分子对接和激酶活性分析发现H-89通过占据ATP结合位点,抑制S6K1活性。值得注意的是,H-89和SP600125均抑制PKA的活性,而且两者联合进一步抑制了PKA的活性,表明H-89阻断SP600125诱导CMK多倍体化与其对PKA的作用无关,而与S6K1磷酸化修饰状态的改变有关。结论 H-89通过调节S6K1磷酸化阻断SP600125诱导CMK细胞多倍体化。
- 赵松杨金刚李长岭邢思宁于颖刘硕蒲菲菲马东初
- 关键词：巨核细胞
- 核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)介导SP600125诱导的巨核细胞白血病细胞系多倍体化依赖于细胞分化程度被引量：3
- 2016年
- 目的探讨核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)在不同分化程度巨核细胞白血病细胞系多倍体化中的调控作用。方法采用c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125诱导Dami、Meg-01和HEL细胞多倍体化,使用蛋白激酶A抑制剂H-89阻断SP600125药物作用,流式细胞术分析表型(CD41a、CD42a和CD42b)和DNA倍性,Western blot法检测S6K1相关蛋白的表达及磷酸化修饰位点的变化。结果 SP600125诱导多倍体化和真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)磷酸化。然而,SP600125诱导多倍体化的程度不同,对Dami细胞作用最强、HEL细胞次之、Meg-01细胞最弱。而且SP600125上调Dami细胞的S6K1Thr421/Ser424磷酸化并下调Thr389磷酸化,仅上调HEL细胞的Thr389磷酸化,对Meg-01细胞的S6K1无影响。虽然H-89下调SP600125诱导的3种细胞系中4E-BP1磷酸化,但只部分阻断Dami细胞多倍体化及下调S6K1 Thr421/Ser424磷酸化和上调Thr389磷酸化。尽管H-89上调Meg-01细胞和HEL细胞的S6K1 Thr389磷酸化,但其对Thr421/Ser424磷酸化无影响,而且也不能阻断两者的多倍体化。表型分析显示3种细胞系处于不同的分化水平,即Dami细胞最高、HEL细胞次之、Meg-01细胞最低。结论SP600125诱导巨核细胞白血病细胞系的多倍体化依赖于不同分化程度的细胞系内S6K1对SP600125诱导磷酸化修饰的应答。
- 王丽丽杨金刚李长岭邢思宁于颖刘硕赵松马东初
- 关键词：巨核细胞
- LTC4S rs730012基因多态性与东北儿童哮喘关系研究被引量：6
- 2017年
- 目的研究白三烯C4合成酶（LTC4S）基因rs730012单核苷酸多态性（SNP）与儿童哮喘关系。方法选取东北地区105例哮喘患儿为病例组，128例非哮喘患儿为对照组，应用聚合酶链反应（PCR）及测序法对研究对象LTC4Srs730012位点基因分型，分析该位点基因多态性与哮喘遗传易感性及临床特征关系。结果（1）病例组LTC4Srs730012位点A／A、A／C、C／C基因型频率分别为71．4％、25．7％、2．9％，A、C等位基因频率分别为84．3％、15．7％：对照组A／A、A／C、C／C基因型频率分别为70．3％、28．9％、0．8％，A、C等位基因频率分别为84．8％、15．2％。病例组基因型与等位基因频率与对照组无明显差异（X2=0．035、0．020，P均〉0．05）；（2）中重度组A／C、C／C基因型频率及C等位基因频率均明显高于轻度组，差异具有统计学意义（X2=5．859、5．641，P均〈0．05）；（3）A／A型SaO：较A／C、C／C型高，差异具有明显统计学意义（t=2．976，P〈0．05），FeNO值及阻塞性通气障碍发生率均较A／C、C／C型低，差异均有统计学意义（t=-2．946、r=5．564，P均〈0．05）。结论LTC4Srs730012位点SNP与中国东北地区哮喘患儿是否发病无关，但与哮喘发病时严重程度有关，与FeNO值、肺功能指标、SaO：等临床指标有关。
- 廖世峨魏兵于晓晴祝华赵松于聪李婉莹
- 关键词：基因多态性儿童哮喘
- 核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)介导SP600125诱导的巨核细胞白血病细胞系多倍体化依赖于细胞分化程度
- 目的探讨核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)在不同分化程度巨核细胞白血病细胞系多倍体化中的调控作用。方法采用c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125诱导Dami、Meg-01和HEL细胞多倍体化,使用蛋白激酶A...
- 王丽丽杨金刚李长岭邢思宁于颖刘硕赵松马东初
- 关键词：巨核细胞
- 白三烯C4合成酶基因多态性与儿童哮喘易感性及孟鲁司特疗效关联研究被引量：9
- 2018年
- 目的研究白三烯C4合成酶(LTC4S)基因rs730012、rs3776944两个单核苷酸多态性位点(SNPs)与儿童哮喘易感性和孟鲁司特疗效的关系,以指导哮喘早期预防及精准治疗。方法选取2016年5月-2017年8月沈阳军区总医院就诊的哮喘患儿215例为病例组,228例非哮喘儿童为对照组,应用聚合酶链反应(PCR)及测序法对所有研究对象LTC4Srs730012、rs3776944位点进行基因分型,并于孟鲁司特治疗前后进行肺功能、尿LTE4儿童哮喘控制测试问卷(CACT)评分。结果 1)病例组与对照组在rs730012及rs3776944位点基因型频率差异均无统计学意义(χ2=0.079、0.617,P均>0.05)。2)中重度哮喘组A/C+C/C基因型频率明显高于对照组和轻度哮喘组,差异有统计学意义(χ2=4.129、6.088,P均<0.05)。3)A/C+C/C基因型哮喘患儿在经过孟鲁斯特钠治疗后FEF50、FEF75改善率明显高于A/A型患儿(P均<0.05),而单纯应用布地奈德组患儿差异无显著性(P均>0.05)。4)A/A基因型患儿应用孟鲁司特疗效更佳,较A/C+C/C基因型尿液LTE4改变率高,rs730012和rs3776944位点差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论LTC4Srs730012SNP与哮喘严重程度有关,rs730012及rs3776944SNPs野生型应用孟鲁司特疗效更佳。
- 廖世峨魏兵马明王雪娜魏克伦祝华于聪赵松
- 关键词：白三烯C4合成酶基因多态性儿童哮喘孟鲁司特白三烯受体拮抗剂
- 核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)介导SP600125诱导的巨核细胞白血病细胞系多倍体化依赖于细胞分化程度
- 目的 探讨核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)在不同分化程度巨核细胞白血病细胞系多倍体化中的调控作用。方法 采用c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125诱导Dami、Meg-01和HEL细胞多倍体化,使用蛋白激...
- 王丽丽杨金刚李长岭邢思宁于颖刘硕赵松马东初
- 关键词：巨核细胞
- 文献传递
- S6K1 C端自抑制假底物结构域磷酸化与Akt去磷酸化协同调节SP600125诱导巨核细胞系多倍体化被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨JNK抑制剂SP600125诱导巨核细胞白血病系多倍体化的调控机制。方法:用SP600125和3种抑制剂(PD184352、U0126和LY294002)处理Dami和CMK细胞,用点突变技术对核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)C端自抑制假底物结构域和疏水基序突变构建的S6K1质粒转染细胞,流式细胞术分析细胞的DNA倍性,Western印迹检测S6K1、MAPK和Akt蛋白的表达及磷酸化修饰位点的变化。结果:当单独使用3种抑制剂时,对Dami和CMK细胞的倍性无影响。当SP600125与3种抑制剂联合时,尽管PD184352下调了p44/42 MAPK在Thr202/Tyr204位点的磷酸化,但其并不抑制SP600125诱导的Dami和CMK细胞的多倍体化;相反,U0126抑制SP600125诱导的Dami和CMK细胞的多倍体化,但并不下调p44/42 MAPK的磷酸化;而LY294002增加Akt的磷酸化,并阻断SP600125诱导的Dami和CMK细胞的多倍体化。这3种抑制剂均在SP600125诱导的多倍体Dami和CMK细胞中部分抑制S6K1的Thr421/Ser424磷酸化,但并不增加S6K1的Thr389磷酸化。转染S6K1突变质粒的Dami细胞,并没有对SP600125诱导的多倍体化产生影响,同时,无论是模拟磷酸化或去磷酸化的Thr389突变均对SP600125诱导的多倍体化无影响,且未显现出与LY294002的协同作用。C端自抑制假底物结构域突变质粒(S6K1-D3E)可以进一步阻断SP600125诱导的已经被LY294002部分阻断的Dami细胞多倍体化。结论:S6K1的C端自抑制假底物结构域磷酸化与Akt去磷酸化协同调节SP600125诱导巨核细胞白血病系的多倍体化。
- 张路遥王丽丽杨金刚邢思宁赵松于颖谢晓冬马东初
- 关键词：AKT巨核细胞
