张文彦
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 供职机构：山东师范大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 番茄叶绿体小分子热激蛋白多克隆抗体的制备被引量：1
- 2007年
- 目的为深入研究叶绿体sHSP的功能,构建有效的原核表达体系,制备高特异性的叶绿体sHSP的多克隆抗体。方法将PCR方法得到的番茄叶绿体小分子热激蛋白基因(cpshsp)全长cDNA基因片段,克隆入融合表达载体pGEX6p-1中,在强启动子作用下在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中诱导表达,并将sHSP纯化产物免疫新西兰大白兔,western blot检测sHSP多克隆抗体。结果表达菌株经0.2 mmol/L IPTG诱导4h后,GST-CPsHSP形成包涵体,sHSP纯化产物免疫新西兰大白兔后得到叶绿体sHSP多克隆抗体,western blot检测表明该抗体的特异性和效价较好。结论构建的原核表达载体pGEX6p-1/cpshsp,在一定的诱导条件下,在DE3中得到稳定高效的融合表达,为制备叶绿体sHSP抗体提供足够的抗原,为进一步研究叶绿体sHSP的功能奠定了基础。
- 胡小然张文彦
- 关键词：原核表达包涵体多克隆抗体
