张清华
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院生物资源基因工程重点实验室更多>>
- 发文基金：自治区科技支疆项目计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 新疆双峰驼抗血清中重链抗体的分离鉴定被引量：6
- 2010年
- 【目的】初步探讨新疆双峰驼Camelus bactrianus免疫系统中缺失轻链的重链抗体(heavy chain antibody,HCAb)是否具有常规抗体的基本抗原结合功能。【方法】采用本实验室构建的丹毒丝菌表面蛋白A原核表达载体pGEX4T-1-spaA-N,进行诱导表达,纯化获得重组抗原GST-SpaA-N,免疫双峰驼制备抗血清,经Protein A和Protein G亲和层析从抗血清中分离重链抗体及常规抗体,Western blotting鉴定重链抗体的抗原结合特性,间接ELISA比较重链抗体与传统抗体的抗原结合活性。【结果】经过Protein A/G纯化得到了IgG2。对各组分进行分析初步表明重链抗体约占血清IgG的60%—80%。采用GST-SpaA-N免疫双峰驼可以诱导高滴度的IgG2型重链抗体,在5次免疫后,骆驼抗spaA-N特异的重链抗体IgG2多抗血清的效价为1﹕51200。Western blotting结果显示分离的多克隆重链抗体可特异结合SpaA天然抗原,且ELISA分析结果表明重链抗体与常规抗体具有相同的抗原结合活性。【结论】首次从双峰驼抗血清中成功分离获得具有与常规抗体相同生物学功能的多克隆重链抗体,提示重链抗体可能在骆驼免疫防御中发挥重要作用。
- 夏丽洁苏幼红张清华夏雪琴刘红春李江伟
- 关键词：双峰驼
- 新疆双峰驼天然单域抗体库的构建及初步鉴定被引量：3
- 2011年
- 旨在构建新疆双峰驼天然单域抗体库,及从中快速筛选VHH抗体。采用两种不同的抗原(溶菌酶和cAb-HEWL23)用天然文库进行筛选,成功筛选到了相应的抗体,并以溶菌酶筛选的VHH抗体(A3-1,A4-1和A10-1)进行表达和初步的ELISA检测。结果显示,A3-1和A10-1具有结合溶菌酶的能力。该方法简单方便、省时省力,可以快速从天然单域抗体库中筛选VHH抗体。
- 张清华夏雪琴克力比努尔.热合曼李江伟
- 关键词：溶菌酶噬菌体展示单域抗体VHH
