曾丽娟
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：武汉工业学院生物与制药工程学院更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 麦角碱的提取与分离纯化被引量：4
- 2010年
- 通过大孔树脂D-101吸附法提取雀稗麦角菌发酵液中麦角总碱粗品。采用硅胶薄板层析确定粗品组分及洗脱条件,进行碱性硅胶柱低压层析,单因素实验确定洗脱溶剂的比例及洗脱次数,最终分离纯化得到麦角总碱,计算总回收率。结果表明:总生物碱回收率为77.6%。硅胶层析分离上样量与硅胶质量比为1∶20,去杂洗涤剂为氯仿:甲醇=5∶1(V/V)的混合液,依次洗涤5次。用氯仿-甲醇2∶1(V/V)的洗脱剂洗脱,得到麦角总碱;从雀稗麦角菌发酵液中提纯麦角碱法回收率及纯度较高,具有广阔的应用前景。
- 曾丽娟李琦刘志国马寅众付云洁
- 关键词：纯化
- 蛋白G IgG Fc段结合域的克隆表达及功能研究被引量：1
- 2009年
- 旨在研究蛋白G IgG Fc段结合域(PGFB)的克隆、表达及其抗体结合功能,用于抗体的纯化。根据PGFB的氨基酸序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成了4个寡核苷酸片段。通过重叠延伸PCR方法合成了PGFB DNA片段,测序鉴定后克隆至原核表达系统pET-28a-c(+)上,转化大肠杆菌,获得表达菌株;IPTG诱导表达PGFB,经Ni+-NTA琼脂糖凝胶层析纯化后偶联到琼脂糖凝胶6B上,用其纯化多克隆抗体。结果显示,PGFB在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,纯化后纯度达到90%以上,相对分子量为12.25 kD,与预期值相符。此外,偶联产物纯化多克隆抗体达到了良好的效果,每毫升基质可结合20 mg抗体。本研究克隆构建并高效表达了具有较好抗体亲和能力的PGFB,为多克隆抗体的快速纯化提供了方便。
- 房国梁刘志国宗义强张大川曾丽娟付云洁屈伸
- 关键词：IGG多克隆抗体原核表达
- 雀稗麦角菌原生质体诱变育种及发酵条件研究被引量：1
- 2009年
- 为获得麦角碱高产菌株,提高雀稗麦角菌(Claviceps paspali strain3103)发酵的产碱率,用溶壁酶水解处理菌丝体、不同浓度的亚硝基胍诱变处理制备的原生质体,经再生培养获得诱变菌株,再经紫外初筛后进行发酵复筛,采用Van-Urk方法测定产碱量。筛选得到的高产菌株进行二级发酵并优化其发酵条件。实验结果表明,经亚硝基胍诱变处理,麦角总碱的产率由90mg/L提高到了1600mg/L,增加了约16倍;单位产碱率由22.5mg/L/g提高到了400mg/L/g,增加了约17倍;连续传代培养可以得到稳定的高产菌株,接种量为20%时可有效缩短发酵周期。结果表明,用亚硝基胍对原生质体进行诱变处理可有效提高C.papspali的产碱率。
- 韩增飞刘志国曾丽娟房国梁付云洁
- 关键词：原生质体亚硝基胍诱变育种发酵
