李从新
- 作品数：2 被引量：13H指数：1
- 供职机构：蚌埠医学院更多>>
- 发文基金：国家级大学生创新创业训练计划安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 微小RNA-21对人乳腺癌细胞株紫杉醇耐药性的影响及其机制被引量：13
- 2015年
- 目的：探讨微小RNA-21（miR-21）对人乳腺癌细胞MCF-7和SKBR-3及其紫杉醇耐药株细胞生物学活性的影响。方法：体外研究采用紫杉醇逐步加量诱导法建立人乳腺癌细胞紫杉醇耐药株；通过观察细胞形态的变化和检测耐药基因MDRl、BCRP、MRPl的表达以鉴定耐药细胞株；检测MCF-7和SKBR-3亲本及耐药细胞中miR-21和凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达水平；用miR-21抑制剂和模拟物分别转染MCF-7和SKBR-3耐药和亲本细胞株，MrIT法和流式细胞术检测转染miR-21抑制剂后细胞对紫杉醇的敏感程度和细胞周期、凋亡的变化，并检测耐药基因和凋亡相关基因的表达。结果：成功建立人乳腺癌细胞紫杉醇耐药株MCF-7／PR和SKBR-3／PR，耐药细胞株中耐药基因MDRl、BCRP、MRPl表达均升高，抗凋亡基因Bcl-2升高，凋亡基因Bax下降，miR-21表达升高（P〈0．05）；与对照组比较，miR-21抑制剂可提高耐药细胞株对紫杉醇的药物敏感性，增加细胞凋亡水平，增加细胞周期中G0／G1期细胞（P〈0．05），并可抑制耐药细胞株耐药基因的表达，降低Bcl-2／Bax比值（P〈0．05），而miR-21模拟物可刺激亲本细胞出现耐药细胞形态改变，并上调耐药基因的表达及Bcl-2／Bax比值（P〈0．05）。结论：乳腺癌紫杉醇耐药细胞株MCF-7／PR和SKBR．3／PR中miR-21表达上调；抑制miR-21表达可逆转人乳腺癌MCF-7／PR、SKBR-3／PR细胞株对紫杉醇化疗的耐药性。
- 赵遵兰蔡颖王洋洋夏春磊李从新陈素莲杨清玲陈昌杰
- 关键词：微RNAS抗药性
- vMIP-Ⅱ N端肽对趋化因子受体CXCR4表达调控的机制研究
- 2016年
- 目的：探讨病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ（v MIP-Ⅱ）对乳腺癌细胞CXCR4表达的影响及分子机制。方法：设计并合成扩增CXCR4核心启动子基因序列,构建荧光素酶报告载体,酶切鉴定;通过检测报告基因荧光素酶活性反映病毒巨噬细胞炎性蛋白N端21肽（NT21MP）对CXCR4启动子的作用;通过荧光定量PCR技术和Western blot检测CXCR4干扰或过表达、HER-2干扰,以及miRNAs抑制剂和类似物转染后相关基因及miRNAs表达;采用磺酰罗丹明B（SRB）染色法检测细胞增殖活性,PI染色法检测细胞周期,Annexin V/PI染色法检测细胞凋亡。结果：NT21MP下调CXCR4的表达,并上调miR-125b、miR-135a和miR-146a的表达（P〈0.05~P〈0.01）;NT21MP降低CXCR4核心启动子的活性;SP1为CXCR4核心启动子高频结合转录因子,miR-135a可下调SP1的表达（P〈0.01）;过表达CXCR4上调HER-2表达（P〈0.01）,而干扰CXCR4表达则下调HER-2表达（P〈0.01）;miR-125b可下调HER-2的表达（P〈0.01）;HER-2表达下调诱导miR-146a的表达;miR-146a抑制CXCR4表达（P〈0.01）;相对于空白对照组,miR-146a和miR-135a均可抑制细胞增殖,阻断细胞周期,并诱导凋亡（P〈0.01）。结论：NT21MP通过诱导miR-125b、miR-135a和miR-146a负调控CXCR4的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖能力,为NT21MP应用于乳腺癌患者的治疗提供了理论基础。
- 吴海华李钰张凌宇王海凤杭旭东李从新陈素莲陈昌杰杨清玲
- 关键词：CXCR4微小RNA
