- 柽柳GRAS转录因子基因启动子克隆和表达分析被引量：4
- 2016年
- 克隆获得柽柳GRAS转录因子基因启动子序列,并对其表达模式进行分析,从而初步探究GRAS转录因子基因的表达特征和功能。CTAB法提取刚毛柽柳基因组DNA,按照Genome Walking Kit说明克隆GRAS转录因子基因启动子序列,将克隆获得的GRAS转录因子基因启动子序列定向替换p CAMB1301载体上的35S启动子序列,构建融合表达载体,以驱动GUS基因表达,瞬时侵染拟南芥后进行GUS基因的染色。成功克隆获得刚毛柽柳936 bp的GRAS转录因子基因启动子序列。PLACE和Plant CARE数据库分析结果表明该启动子不仅包含启动子区的核心元件CAAT-box和TATA-box,还含有多个与逆境应答有关的顺式调控元件。成功将GRAS基因启动子序列定向置换p CAMBIA1301的35S启动子,构建重组载体PGRAS::GUS。瞬时转化拟南芥后GUS染色,结果显示转基因拟南芥叶片被染色而根部着色较浅。初步表明克隆获得的GRAS基因启动子具有启动子表达活性,其可能参与了柽柳的抗逆应答,为进一步分析该基因的抗逆功能和抗逆机制奠定了基础。
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- 关键词：刚毛柽柳启动子
