武天祥
- 作品数：6 被引量：4H指数：2
- 供职机构：大连海洋大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 杜氏盐藻促有丝分裂活化蛋白激酶DsMAPK的原核表达及纯化（英文）
- 2015年
- 盐藻是研究植物耐盐机制的重要模式生物,而MAPK基因在植物耐盐分子途径中起重要作用。该试验通过PCR扩增Ds MAPK基因的开放阅读框(ORF),并将其克隆至带有GST标签的原核表达载体p GS-21a,得到重组表达载体p GS-21a-MAPK。将重组表达载体转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,然后对融合蛋白进行表达形式分析,利用GSTSefinoseTMKit进行纯化,所得产物进行SDSPAGE和Western blot鉴定。结果表明,该试验成功构建了重组表达载体p GS-21a-MAPK,经IPTG诱导后表达的融合蛋白与预期相符,纯化后的上清蛋白经Western blot检测显示该融合蛋白能与抗GST单克隆抗体特异性结合,具有良好的免疫学活性,Ds MAPK的成功表达为进一步在蛋白质水平上研究其在盐藻耐盐机制中的作用奠定了基础。
- 岳文静柴晓杰刘丽颖武天祥刘艺琼
- 关键词：杜氏盐藻原核表达纯化
- 杜氏盐藻耐盐分子机制的研究进展（英文）被引量：2
- 2016年
- 盐藻是已知最为耐盐的真核生物之一,是研究植物高盐适应的最理想的模式生物。近年来,随着分子生物学技术的发展,盐藻耐盐分子机制的研究也备受国内外学者的瞩目。本文就盐藻适应高盐环境的渗透调节、盐藻耐盐相关基因和蛋白质以及盐胁迫信号转导途径等方面的研究做一简要的综述。
- 武天祥柴晓杰丛玉婷刘丽颖刘艺琼
- 关键词：盐藻分子机制
- 杜氏盐藻磷脂酶C基因DsPLC的原核表达与纯化被引量：2
- 2016年
- 为了进一步研究磷脂酶C的生理功能,利用RT-PCR技术扩增了Ds PLC的开放阅读框序列,并与质粒p GS21a连接,构建了原核表达载体p GS21a-Ds PLC。将该重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)诱导表达出融合蛋白。经SDS-PAGE检测,融合蛋白在包涵体和上清中均存在。可溶性蛋白经His柱纯化后进行电泳分析,结果表明,在96k Da左右有单一的蛋白条带,说明融合蛋白得到有效纯化。蛋白印迹结果显示在96kDa左右有明显的杂交条带,初步证明纯化的蛋白是带有His标签的磷脂酶C。盐藻磷脂酶C的成功表达与纯化,为深入探讨磷脂酶C的性质及功能奠定了基础。
- 刘丽颖柴晓杰丛玉婷武天祥刘艺琼
- 关键词：盐藻磷脂酶C蛋白纯化蛋白印迹
- 杜氏盐藻PKC基因的克隆及表达分析
- 杜氏盐藻（Dunaliella salina）是已知最耐盐的单细胞真核绿藻，是研究植物适应高盐的模式生物。许多学者从耐盐相关基因和盐适应蛋白等方面进行了研究，取得了一些进展。但盐藻的耐盐性是由一系列相关基因、蛋白质等相互...
- 武天祥
- 关键词：杜氏盐藻蛋白活性亚细胞定位基因表达
- 盐藻淀粉磷酸化酶基因DsSP的克隆及原核表达
- 采用RT-PCR和RACE的方法从杜氏盐藻中克隆出1种淀粉磷酸化酶基因(Gen Bank accession No.KF061044)命名为Ds SP,并对其进行了系统的生物信息学分析.结果表明:盐藻Ds SP基因的c ...
- 柴晓杰刘世才丛玉婷刘丽颖武天祥刘艺琼
- 关键词：杜氏盐藻克隆原核表达
- 文献传递
- 杜氏盐藻MAPKK激酶基因DsMAPKKK的克隆、原核表达与纯化
- 2015年
- 为了进一步研究MAPKK激酶的生理功能,利用RT-PCR技术扩增了Ds MAPKKK的开放阅读框序列,并利用T4连接酶与质粒p GS21a连接,构建了原核表达载体p GS21a-Ds MAPKKK。将该重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导成功表达了融合蛋白。经SDS-PAGE检测,融合蛋白在上清和包涵体中均存在。可溶性蛋白经过GST柱纯化,电泳分析结果表明,在68 k D左右有单一的蛋白条带,说明融合蛋白得到有效纯化。蛋白印迹结果显示在68 k D左右有明显的杂交条带,初步证明纯化的蛋白就是带有GST标签的MAPKK激酶。Ds MAPKKK的成功表达与纯化,为深入探讨Ds MAPKK激酶的性质及功能打下了坚实的基础。
- 柴晓杰刘艺琼王逸云武天祥刘丽颖
- 关键词：杜氏盐藻原核表达蛋白印迹
