目的:为降低聚阳离子基因载体polyplex的正电荷和毒性,在其表面构建中性磷脂膜制备lipopolyplex,并测定lipopolyplex对小鼠结肠癌细胞CT26和人乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性。方法:采用PEI25KDa与DNA复合制备polyplex,在polyplex体系中加入中性脂质体和SADGE制备lipopolyplex。采用琼脂糖凝胶电泳考察lipopolyplex对质粒DNA的包裹能力;采用激光粒度仪和zeta电位分析仪测定lipopolyplex的粒径与zeta电位;采用透射电镜观察lipopolyplex的形态;采用CCK-8试剂盒考察lipopolyplex对CT26和MCF-7的细胞毒性。结果:琼脂糖凝胶电泳显示lipopolyplex可以完全包裹质粒DNA;lipopolyplex的粒径在200 nm左右,电位在-20 m V左右;透射电镜下为较为规则的球状颗粒;lipopolyplex在CT26和MCF-7细胞中的毒性明显低于聚阳离子基因载体polyplex。结论:在polyplex表面成功构建中性磷脂膜制备的lipopolyplex,可以完全的包裹DNA并且细胞毒性明显低于polyplex,在基因输送载体领域具有潜在应用价值。
目的:制备担载血管生长因子(VEGF)的乳液法静电纺丝纤维膜,对其开展一系列表征,从而研究其血管再生的潜能。方法:通过W/O乳液法制备担载VEGF的静电纺丝纤维膜,并对其形态、力学性质进行表征。用VEGF ELISA分析方法对其体外释放动力学进行研究。运用CCK-8法检测乳液法静电纺丝纤维膜中VEGF的活性变化。结果:乳液法静电纺丝纤维膜呈现连通的三维网状结构,平均直径为1μm,模拟了细胞外基质(ECM),最大拉伸应力为3.03±0.66 M Pa,具有良好的抗拉伸能力,能够支持细胞的生长。乳液法纤维膜中VEGF在体外累积释放了14天,总释放量超过20000 pg,达到血管再生的有效浓度。CCK-8结果显示,乳液法纤维膜中的VEGF仍然保持较高的蛋白活性。结论:担载VEGF的乳液法静电纺丝纤维膜能够缓释出活性的蛋白,具有血管再生的潜能。
