肖惠文
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市科技计划中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ^(137)Csγ射线全身照射对小鼠骨髓细胞中circRNA m^(6)A修饰谱的影响
- 2021年
- 目的研究电离辐射对小鼠骨髓细胞中环状RNA(circular RNA,circRNA)的N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenine,m^(6)A)修饰谱的影响,为揭示RNA表观遗传修饰与放射性造血系统损伤之间的关系提供科学依据。方法将24只C57BL/6 J小鼠按随机数表法分为健康对照组和照射组,每组12只。照射组用4 Gy^(137)Csγ射线对小鼠进行全身照射。照后将两组小鼠脱颈处死,收集股骨中的骨髓细胞。提取总RNA,通过m^(6)A RNA免疫沉淀-高通量测序(MeRIP-Seq)技术和生物信息学分析方法,探究小鼠受照后骨髓细胞中circRNA m^(6)A修饰谱的变化。运用MeRIP-qPCR实验对变化显著的m^(6)A修饰位点进行验证。结果健康对照组和照射组中各鉴定出325和455个(其中两组共有178个,健康对照组特有147个,照射组特有277个)circRNA的m^(6)A修饰位点。健康对照组和照射组中各鉴定出1275和1017个(其中两组共有767个,健康对照组特有508个,照射组特有250个)发生m^(6)A修饰circRNA的来源基因。与健康对照组相比,照射组中有414个m^(6)A位点的富集倍数显著上调,178个m^(6)A位点的富集倍数显著下调,差异具有统计学意义(P<10^(-10);倍数筛选阈值>5)。基因本体论(GO)分析显示,电离辐射后小鼠骨髓细胞中m^(6)A修饰水平显著改变的circRNA来源基因涉及染色质相关调控、纤毛转换纤维和多聚(A)特异性核糖核酸酶活性等多种功能。京都基因与基因组百科数据库(KEGG)分析显示,电离辐射后小鼠骨髓细胞中m^(6)A修饰水平显著改变的circRNA来源基因涉及血小板激活、FcγR-介导的吞噬作用和B细胞受体信号通路等多种通路。结论电离辐射可引起小鼠骨髓细胞中circRNA的m^(6)A修饰谱的迅速改变,差异甲基化的circRNA的来源基因涉及多种造血系统放射生物学相关的功能通路。该研究为从表观遗传水平揭示造血系统辐射损伤的分子机制奠定基础。
- 张书琴崔明张梦然李源肖惠文董佳丽尚悦樊赛军
- 关键词：Γ射线骨髓细胞
- 降低B7-H3蛋白对受照肺癌细胞A549细胞周期和凋亡的影响被引量：2
- 2017年
- 目的 观察用小干扰RNA（siRNA）敲降B7-H3蛋白的表达对人肺癌细胞A549的细胞周期和凋亡的影响.方法 培养人肺癌A549细胞,将B7-H3蛋白siRNA瞬时转染于A549细胞（称为siB7-H3转染组）.实验分为4组,即对照组、siB7-H3转染组、照射组、照射＋siB7-H3转染组.采用137Cs γ射线一次性照射,照射剂量为4 Gy;用Western blotting法和实时定量PCR分别检测B7-H3蛋白和mRNA的表达;流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的改变.结果 与对照组相比,siB7-H3转染组的B7-H3蛋白水平明显降低,mRNA表达量也明显低于对照组且差异有统计学意义（t=-4.222,P=0.013）.siB7-H3转染组细胞的G0/G1期细胞阻滞,S和G2/M期细胞数量减少;与对照组相比,照射组出现轻微的G0/G1期阻滞和明显的G2/M期细胞阻滞,照射＋siB7-H3转染组的G0/G1、G2/M期均有明显的阻滞.照射后48 h,与对照组相比,照射组细胞的坏死率和凋亡率明显升高,siB7-H3转染组和照射＋siB7-H3转染组的坏死率和凋亡率均无明显改变.结论 降低肺癌A549细胞中B7-H3蛋白表达水平可明显增加辐射诱导的G0/G1期阻滞,从而提示B7-H3表达水平的改变可能通过调节G0/G1细胞周期检查点而对肺癌细胞放射敏感性产生重要的调节功能.
- 董佳丽罗丹李源肖惠文路璐崔明樊赛军
- 关键词：细胞周期B7-H3SIRNA
- 水素水对肠型急性辐射损伤救治作用的研究
- 肖惠文崔明樊赛军
- 姜黄素对非小细胞肺癌细胞A549和H460放射敏感性的影响被引量：3
- 2020年
- 目的 探讨姜黄素对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞A549和H460放射敏感性的影响,并探索长链非编码RNA(lncRNA)同源异型盒基因转录的反义基因间RNA(HOTAIR)在其中的调节机制.方法 将培养的NSCLC细胞A549和H460根据处理方法的不同,采用4种方式进行分组.(1)分别将NSCLC细胞A549和H460分为6组:0、15、30、60、120和240 μmol/L姜黄素组,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验检测各组细胞的增殖活力;(2)分别将NSCLC细胞A549和H460分为8组:0、2、4、6 Gyγ射线照射组及其与30 μmol/L姜黄素联合组,采用CCK-8实验和平板克隆形成实验检测各组细胞的增殖活力;(3)将NSCLC细胞A549分为4组:空白对照组、30 μmol/L姜黄素组、4 Gyγ射线照射组和30μmol/L姜黄素+4 Gyγ射线照射联合组,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测各组细胞中5种促癌lncRNA和5种抑癌lncRNA的表达情况;(4)将NSCLC细胞A549分为6组:空白对照组、30 μmol/L姜黄素组、30 μmol/L姜黄素+lncRNA HOTAIR过表达组、4Gyγ射线照射组、4Gyγ射线照射+30 μmol/L姜黄素联合组和4Gyγ射线照射+30 μmol/L姜黄素+lncRNA HOTAIR过表达组,采用CCK-8实验和平板克隆形成实验检测各组细胞的增殖活力.采用学生t检验进行统计学分析.结果 (1) CCK-8实验结果显示,不同浓度的姜黄素处理可以剂量和时间依赖的方式降低NSCLC细胞A549和H460的增殖活力,且除了15 μmol/L姜黄素作用24 h之外,其余浓度和时间的姜黄素组与对照组相比,差异有统计学意义(t=3.884~5.731,P=0.000~0.043).(2) CCK-8实验和克隆形成实验结果显示,30 μmol/L姜黄素+不同剂量的γ射线照射联合处理可使γ射线照射单独处理下的NSCLC细胞A549和H460的增殖活力和克隆形成能力进一步降低,差异有统计学意义(t=2.503~12.418,P=0.000~0.044).(3)qRT-PCR实验结果显示,与空白对照组相比,lncRNA HOTAIR在γ射线单独处理后表达升高(t=3.317,P=0.040),而30 μmol/L姜黄素单独处�
- 张书琴崔明肖惠文樊赛军
- 关键词：姜黄素辐射耐受性
- 乳化剂吐温-80和丁酸对辐射诱导胆汁酸肠肝循环障碍的影响
- 2021年
- 目的研究乳化剂吐温-80(Tween-80)对电离辐射诱导胆汁酸肠肝循环障碍的影响。方法48只雄性C57BL/6 J小鼠按照随机数表法分为健康对照组、单纯照射组、照射+Tween-80组和照射+Tween-80+丁酸组,每组12只。采用特制的屏蔽装置及γ射线辐照仪对小鼠进行腹部局部照射。照射前7 d,照射+Tween-80组和照射+Tween-80+丁酸组小鼠每天给予Tween-80灌胃,健康对照组及单纯照射组给予水灌胃;照射后照射+Tween-80+丁酸组每天给予丁酸灌胃直至麻醉处死,健康对照组、单纯照射组和照射+Tween-80组分别每天给予水灌胃直至麻醉处死。照射后21 d,取小鼠小肠及粪便样品,通过酶联免疫吸附试验检测小鼠小肠及粪便中胆汁酸的含量;通过实时定量聚合酶链反应(PCR)检测小肠和(或)结肠样品中TGR5及JAM-A的表达,计算白介素10(IL-10)/白介素12(IL-12)比率的变化;通过免疫组织化学染色比较结肠中GPR43蛋白的含量。结果与单纯照射组相比,Tween-80预处理的受照小鼠小肠中胆汁酸含量进一步降低,粪便中胆汁酸含量升高(7.92%、7.99%,t=3.93、2.94,P<0.05);介导胆汁酸发挥生物学功能的TGR5受体及其下游JAM-A表达水平下降(20.93%、9.91%,t=4.85、5.14,P<0.05)、结肠IL-10/IL-12比率(抗炎指标)降低(4.59%,t=3.39,P<0.05);结肠中能结合短链脂肪酸使其发挥作用的GPR43蛋白表达量降低。丁酸给药使得小鼠小肠胆汁酸含量回升(8.06%,t=9.25,P<0.05)、粪便中胆汁酸含量降低(14.41%,t=4.71,P<0.05);TGR5及JAM-A表达量升高(19.35%、32.71%,t=7.69、19.23,P<0.05),小肠及结肠IL-10/IL-12比率升高(2.39%、4.05%,t=3.38、5.92,P<0.05);结肠中GPR43蛋白含量增加。结论Tween-80加重电离辐射诱导的小鼠胆汁酸肠肝循环障碍,给予丁酸能够改善Tween-80对受照小鼠胆汁酸肠肝循环的抑制作用。
- 李源樊赛军肖惠文董佳丽张书琴崔明
- 关键词：吐温-80丁酸
- 肠道罗斯拜瑞氏菌在制备肿瘤的放射增敏剂中的用途
- 本发明属于医药技术领域，涉及肠道罗斯拜瑞氏菌在制备肿瘤的放射增敏剂中的用途。通过研究发现，肠道罗斯拜瑞氏菌(Roseburia intestinalis)能够显著提高大肠癌对于放射治疗的敏感性，表现为肠道罗斯拜瑞氏菌灌胃...
- 崔明董佳丽李源肖惠文王滨张书琴
