于玲燕
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：赤峰学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 视网膜血管内皮细胞高糖模型糖浓度及培养时间的筛选被引量：1
- 2017年
- 目的:筛选Wistar大鼠视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVEC)高糖模型糖浓度及培养时间。方法:取出生1~3d的Wistar大鼠,分离RVEC进行原代培养,Ⅷ因子抗体免疫组化鉴定细胞;设立葡萄糖浓度0mmol/L为正常对照组(C组),按不同葡萄糖浓度依次分为10mmol/L(A组)、15mmol/L(B组)、25mmol/L(D组)、35mmol/L(F组),分别在24、48、72h的3个时间点用MTT法检测各组细胞OD值,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果:RVEC纯度达94%;MTT法检测不同浓度葡萄糖对Wistar大鼠RVEC的影响:培养24h,各组的OD值比较差异无统计学意义(F=0.42,P=0.7411);培养48h,五组OD值比较差异有统计学意义(F=45.2,P=0.000),五组间两两比较,除A组、B组、C组间差异无统计学意义外(Q_(48AB)=44.0427,Q_(48AC)=36.4701,Q_(48BC)=27.7953,均P>0.05),其余各组两两比较差异均有统计学意义(其中Q_(48CD)=11.0715,Q_(48AD)=14.0794,Q_(48AF)=12.2964,Q_(48BD)=23.4698,Q_(48BF)=12.7016,Q_(48DF)=10.2013,均P<0.05;Q_(48CF)=6.4701,P<0.01)。培养72h后,五组OD值比较差异有统计学意义(F=37.46,P=0.000),五组间两两比较,同样A、B、C三组间差异无统计学意义(Q_(72AB)=27.7338,Q_(72AC)=25.0054,Q_(72BC)=33.3797,均P>0.05),其余各组差异均有统计学意义(其中Q_(72AD)=13.4793,Q_(72BD)=12.7546,均P<0.05;Q_(72CD)=7.3743,Q_(72CF)=8.3465,Q_(72AF)=4.7455,Q_(72BF)=3.9471,Q_(72DF)=3.2649,均P<0.01)。不同浓度葡萄糖在不同时间点对RVEC凋亡率的影响:培养24h后各组间差异无统计学意义(P>0.05)。培养48h后,五组间两两比较,Q_(48AB)=31.1704,Q_(48AC)=33.5947,Q_(48BC)=29.3968,Q_(48AD)=30.4097,Q_(48BD)=28.8164,均P>0.05;Q_(48CD)=12.5032,Q_(48AF)=11.7531,Q_(48BF)=14.1076,Q_(48DF)=13.9372,均P<0.05;Q_(48CF)=7.0953,P<0.01。培养72h后,五组间两两比较,Q_(72AB)=26.3392,Q_(72AC)=24.9142,Q_(72BC)=30.2976,均P>0.05,其余各组差异均有统计学意义(其中Q_(72AD)=14.1983,Q_(72BD)=12.9356,均P<0.05;Q_(72CD)=6.8752,Q_(72CF)=7.6745,Q_(72AF)=5.0545,Q_(72B
- 张凤久张丽敏林安岭彭向东刘兵杨建玲于玲燕王海明
- 关键词：视网膜血管内皮细胞葡萄糖浓度
- Wistar大鼠视网膜神经元高糖模型葡萄糖浓度和培养时间的筛选被引量：3
- 2016年
- 目的筛选Wistar大鼠视网膜神经元高糖模型的葡萄糖浓度及培养时间。方法取出生1~3 d Wistar大鼠分离视网膜神经元进行传代培养,尼氏染色法鉴定细胞;实验分5组:A组培养液葡萄糖浓度为0 mmol·L^(-1)(正常对照组),B组浓度为10 mmol·L^(-1),C组浓度为15 mmol·L-1,D组浓度为25 mmol·L^(-1),E组浓度为35 mmol·L^(-1)。分别培养24 h、48 h、72 h后用MTT法检测各组细胞OD值,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果倒置显微镜观察分离培养细胞,大部分细胞于接种24 h后贴壁,少数细胞长出较短的突起,并有向中央聚集生长的现象。2~3 d后长出突起的神经元数目增多,突起长度增加,约为自身胞体长度的1倍。培养5~7 d后神经元突起进一步增多、变长。经尼氏染色后细胞质呈蓝紫色,尼氏小体颗粒状结构清晰。非神经元细胞胞质基本不着色,细胞核呈淡紫色、圆形,核仁清晰可辨,神经元率达91%。各实验组在培养24 h后OD值均低于正常对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。随培养时间延长OD值继续下降,48 h后各组OD值比较差异有统计学意义(P<0.01);其中B组及C组与A组比较差异无统计学意义(均为P>0.05);D组OD值明显下降,与A组比较差异有统计学意义(P<0.05),E组下降更明显,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01)。72 h后各组OD值比较差异有统计学意义(P<0.01);其中B组及C组与A组比较差异无统计学意义(均为P>0.05);D组及E组与A组比较差异有统计学意义(均为P<0.01)。各组在培养24 h后视网膜神经元凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。48 h后各组凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.01);其中B组及C组与A组比较差异无统计学意义(均为P>0.05);D组凋亡率明显升高,与A组比较差异有统计学意义(P<0.05);E组凋亡率升高更明显,与A组比较差异有统计学意义(P<0.01),且与D组比较亦有统计学意义(P<0.05)。72 h后各组凋亡率比较差异有统计学意义(P<0
- 张凤久张丽敏林安岭彭向东刘兵杨建玲于玲燕王海明
- 关键词：葡萄糖浓度
