化晓婷
- 作品数:7 被引量:2H指数:1
- 供职机构:西南大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 家蚕免疫稳态调控分子的鉴定和表达模式分析被引量:2
- 2012年
- 昆虫免疫稳态的维持有赖于准确地激活和有效地抑制Toll或IMD信号通路中的关键转录因子——Dorsal/Dif或Relish。在果蝇等昆虫中,已报道了多种降低转录因子稳定性和活性的免疫稳态调控分子,突变或敲除这类分子导致免疫系统的过度激活。对家蚕Bombyx mori免疫信号通路的研究中,至今为止尚无对这类分子的探索。本研究通过比较基因组学,在家蚕基因组中鉴定了多个可能参与免疫稳态调控的分子,包括Wnt家族成员、Ubc9、FAF和POSH等;并通过检测家蚕被微生物感染后这些分子在多种免疫器官中的诱导表达模式,发现这些分子的表达水平在微生物感染后普遍呈下降趋势,虽然在某些组织中表达量有明显的升高(>1.5倍),但此高表达水平均不能维持且迅速下降;而且免疫稳态调控分子和受其调控的信号通路的对应关系在不同组织中表现出差异。本研究是首次对家蚕免疫稳态调控分子的报道,为深入研究家蚕免疫负调控的分子机制提供了参考。
- 王菲李亚明化晓婷夏庆友
- 关键词:家蚕免疫稳态调控分子病原体感染
- PI3K和受体型酪氨酸激酶介导家蚕麻痹肽免疫诱导信号的传递
- 2014年
- 【目的】普遍存在于鳞翅目昆虫中的ENF肽具有非常相似的结构和生理功能,对昆虫的发育、免疫、应激反应等方面都起着重要的调控作用。有研究报道,作为ENF肽家族成员之一的家蚕Bombyx mori麻痹肽(paralytic peptide,PP)通过激活MAPK来调控家蚕的免疫应答,但其完整的分子作用机制尚不明确。本研究旨在解析传递家蚕PP免疫诱导信号的分子通路。【方法】首先通过荧光定量PCR检测了多种昆虫细胞系在PP诱导下抗菌肽基因的转录水平,并利用Western-blot检测p38 MAPK的磷酸化水平,然后利用不同信号传递分子的抑制剂处理BmE细胞筛选参与传递PP免疫诱导信号的分子。【结果】PI3K抑制剂LY294002和受体型酪酸激酶抑制剂Genistein抑制了PP对BmE细胞抗菌肽基因表达的诱导作用;且BmE细胞和家蚕血细胞在PP的诱导下,Akt和大小约为70 kDa的细胞膜蛋白均出现磷酸化水平的动态变化。【结论】PI3K/Akt信号通路和Genistein敏感性的受体型酪氨酸激酶介导了PP免疫诱导信号的传递。
- 宋亮王菲宋倩茹胡翠美化晓婷夏庆友
- 关键词:家蚕免疫PI3K
- 5-Pyridoxolactone用于制备治疗家蚕核型多角体病毒的药物中的应用
- 本发明公开了5‑Pyridoxolactone用于制备治疗家蚕核型多角体病毒的药物中的应用,通过合理利用抗BmNPV病毒的宿主细胞内的小分子5‑Pyridoxolactone抑制其在细胞内复制,即当细胞被BmNPV病毒感...
- 夏庆友化晓婷
- 文献传递
- 一种利用家蚕生产重组索马甜蛋白的方法
- 本发明公开了一种利用家蚕生产重组索马甜蛋白的方法,本发明通过优化索马甜碱基序列后构建外源蛋白表达载体,显微注射蚕卵,荧光筛选蚕卵获得阳性个体后进行插入位点分析,利用丝腺生物反应器在蚕茧中获得大量表达并具有高甜度的索马甜,...
- 夏庆友张晓满田弛赵萍化晓婷周虹吉
- Bmttv在家蚕翅发育过程中的功能分析
- 2023年
- 【目的】探析家蚕Bombyx mori糖基转移酶基因Bmttv在家蚕翅发育过程中的功能。【方法】通过RACE克隆家蚕Bmttv的CDS全长序列并进行生物信息学分析;使用qRT-PCR检测Bmttv在家蚕不同发育阶段(5龄幼虫、游走期幼虫、预蛹、蛹和成虫)和5龄幼虫不同组织(表皮、翅原基、精巢、马氏管、气管、丝腺、头、血淋巴、脂肪体和中肠)中的表达量;构建过表达载体,瞬时转染BmE细胞,通过免疫荧光对BmTTV进行亚细胞定位,利用qRT-PCR检测家蚕翅发育关键基因BmHippo,Bmwg,BmDpp,Bmsotv和BmHh的表达量。【结果】成功克隆到家蚕Bmttv的CDS全长序列,长2228 bp;BmTTV蛋白具有两个特殊结构域,均与硫酸肝素聚糖(heparan sulfate proteoglycans,HSPGs)的合成相关,与黑腹果蝇Drosophila melanogaster和智人Homo sapiens TTV的氨基酸序列一致性达45%左右,与鳞翅目昆虫TTV的亲缘关系更近。Bmttv主要在家蚕蛹期开始高量表达,在5龄幼虫中肠、精巢和翅原基中高量表达。BmTTV主要定位在BmE细胞质中,过表达Bmttv后与翅发育相关的BmHippo显著下调表达。【结论】BmTTV可能通过参与Hippo信号通路在家蚕翅发育过程中发挥着重要作用,研究结果为后续的深入研究奠定了基础。
- 梁燕李静雯陈胤霖贾文怡夏庆友化晓婷
- 关键词:家蚕HSPGHIPPO
- 家蚕抗BmNPV细胞因子的筛选和分析
- 2018年
- 【目的】探讨家蚕NF-κB类转录因子Bm Relish在抗核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,Bm NPV)感染的免疫应答中的作用,筛选和分析抗病毒细胞因子,完善对家蚕抗病毒免疫机制的认识。【方法】通过Western blot检测当Bm NPV感染家蚕Bm E细胞后Bm Relish全长形式(Bm Relish-FL)是否转变成其活性形式(Bm Relishact);利用荧光定量PCR检测过表达Bm Relishact的细胞在感染Bm NPV后胞内病毒DNA的相对水平,观测在被荧光标记的Bm NPV(Bm NPV-EGFP)感染后呈现EGFP荧光的细胞数,并与作为对照的未表达Bm Relishact的细胞相比较,以确定Bm Relish是否参与抗病毒免疫;将新鲜细胞通过Transwell细胞共培养体系经过表达Bm Relishact的细胞上清培养液孵育后,定量检测在感染Bm NPV后胞内病毒DNA的相对水平,以探讨过表达Bm Relishact的细胞是否产生并分泌抗病毒细胞因子;通过超滤等方法对过表达Bm Relishact的细胞上清培养液予以初步分离,将滤过液和截留液分别孵育新鲜细胞,定量检测感染Bm NPV后胞内病毒DNA的相对水平,从而确定抗病毒细胞因子的分子量范围;用高温处理滤过液和截留液后再孵育新鲜细胞,定量检测感染Bm NPV后胞内病毒DNA的相对水平以确定抗病毒细胞因子的属性;利用LC-MS/MS对滤过液中的多肽做进一步鉴定和分析。【结果】Bm E细胞被Bm NPV感染后,部分Bm Relish-FL转变成其活性形式Bm Relishact;过表达Bm Relishact的细胞被Bm NPV感染后,胞内病毒DNA的相对水平显著低于对照细胞,且呈现EGFP荧光的细胞数也较对照少;新鲜细胞经过表达Bm Relishact的细胞上清培养液孵育后,胞内病毒DNA的相对水平显著低于用对照细胞上清培养液孵育的细胞;用100和3 k D超滤管超滤过表达Bm Relishact的细胞上清培养液后,滤过液仍然具有显著降低所孵育细胞的胞内病毒DNA的相对水平,而截留液无此活性;经高温处理后,该细胞上清培养液�
- 王菲李显扬化晓婷夏庆友
- 关键词:家蚕家蚕核型多角体病毒细胞因子抗病毒免疫
- 5-Pyridoxolactone用于制备抑制家蚕核型多角体病毒的药物中的应用
- 本发明公开了5‑Pyridoxolactone用于制备抑制家蚕核型多角体病毒的药物中的应用,通过合理利用抗BmNPV病毒的宿主细胞内的小分子5‑Pyridoxolactone抑制其在细胞内复制,即当细胞被BmNPV病毒感...
- 夏庆友化晓婷
- 文献传递