周淑艳
- 作品数：8 被引量：8H指数：2
- 供职机构：皖南医学院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目博士科研启动基金安徽高校省级自然科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 敲低赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)促进人诱导性多能干细胞分化为产胰岛素细胞
- 2018年
- 目的探索一种人诱导性多能干细胞(hiPSC)体外高效分化为产胰岛素细胞(IPC)的诱导方案。方法 RNAi技术敲低hiPSC赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)基因后,利用四步法诱导其体外分化为IPC。流式细胞术分析IPC分化效率,实时定量PCR检测细胞LSD1、POU5同源盒转录因子1(OCT4)、Y染色体性别决定区因子17(SOX17)、叉头盒蛋白A2 (FOXA2)、胰腺和十二指肠同源盒蛋白1 (PDX1)、配对盒转录因子4(PAX4)、PAX6、肝细胞核因子6 (HNF6)、肝细胞核因子1同源盒蛋白A(TCF1)、NK6同源盒蛋白1(NKX6. 1)、葡萄糖转运子2(GLUT2)、葡萄糖激酶(GK)、胰岛素及MAF b ZIP转录因子A(MAFA)的mRNA水平,免疫荧光技术检测细胞PDX1、胰岛素的表达和定位;双硫腙(DTZ)染色和透射电镜分别观察细胞内胰岛素的分泌和分泌颗粒分布情况; ELISA检测诱导后细胞胰岛素和C肽分泌量。结果 LSD1敲低组的IPC分化效率较对照组有明显提高,胰岛β细胞发育相关基因SOX17、PDX1、PAX4、胰岛素的mRNA表达显著上调。LSD1敲低组的IPC共表达成熟β细胞特异性蛋白PDX1和胰岛素。另外,这些IPC能感应葡萄糖刺激并以胰岛素分泌小泡形式释放胰岛素,胰岛素或C肽释放量约为天然胰岛细胞的1/6(而对照组仅为1/8)。结论敲低LSD1基因可以促进hiPSC体外高效分化为IPC。
- 周淑艳周淑艳李富荣李阳张翠孙瑶
- 尖吻蝮蛇毒PCA对HUVEC活性的影响被引量：2
- 2017年
- 目的:观察皖南尖吻蝮蛇毒蛋白C激活剂(PCA)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的超微结构及其合成组织因子(TF)、血管性血友病因子(vWF)和内皮素-1(ET-1)水平的影响,并探讨PCA的抗血栓机制。方法:实验分为对照组(DMEM液)、脂多糖(LPS)组(LPS 0.1μg/ml)、PCA组(PCA 1μg/ml)、PCA+LPS组(1μg/ml PCA+0.1μg/ml LPS),加药作用12 h后在透射电镜下观察各组细胞的内质网、线粒体形态及自噬体数量变化;ELISA检测各组培养上清中TF、vWF、ET-1含量;RT-PCR检测细胞内vWF、ET-1基因表达水平;Western blot检测细胞内TF蛋白表达水平。结果:LPS组的HUVEC与对照组相比,细胞膜不光滑、出现凸起样改变,并发生线粒体、内质网肿胀,自噬体数量增多等超微结构的改变,PCA组HUVEC的超微结构与对照组比无明显变化;与LPS组相比,PCA+LPS组的HUVEC线粒体、内质网肿胀消失,自噬体数量明显减少。与对照组相比,LPS组细胞培养上清中TF、vWF、ET-1的含量及细胞内vWF、ET-1基因、TF蛋白的表达水平显著增高(P<0.05);PCA组细胞培养上清及细胞内3种物质的表达量较对照组无显著变化(P>0.05);与LPS组相比,LPS+PCA组HUVEC培养上清及细胞内TF、vWF、ET-1的表达水平显著降低(P<0.05)。结论:1μg/ml的PCA可减轻LPS引起的HUVEC超微结构的改变,也可抑制LPS对HUVEC的TF、vWF、ET-1分泌量的增加作用。
- 桑金凤张根葆周淑艳季娜
- 关键词：脐静脉血管内皮细胞血管性血友病因子内皮素-1
- 尖吻蝮蛇毒PCA对人脐静脉血管内皮细胞的影响被引量：4
- 2015年
- 目的:观察皖南尖吻蝮蛇毒蛋白C激活剂(PCA)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的影响并分析其可能机制。方法:常规培养HUVEC,在倒置显微镜下观察细胞形态变化,用MTT法检测细胞活性。实验分为对照组、LPS损伤组和PCA实验组。将HUVEC接种在96孔板内加药处理,对照组加入PBS缓冲液,LPS损伤组加入0.1μg/m L LPS,PCA实验组分别加入0.16、0.32、0.63、1.25、2.50、5.00、10.00、20.00、40.00μg/m L的PCA溶液和0.16、0.32、0.63、1.25μg/m L的PCA与0.1μg/m L的LPS的混合液。每个浓度设5个复孔,每孔加药200μL,作用12 h后进行细胞活性测定并观察细胞形态。结果:PCA浓度低于2.50μg/m L时对HUVEC活性和形态没有明显影响,但可减轻LPS引起的HUVEC活性抑制和形态改变。高于2.50μg/m L时PCA可抑制HUVEC的活性并引起其形态改变。结论:低浓度PCA在一定程度上可减轻LPS引起的HUVEC损伤。
- 桑金凤张根葆周淑艳
- 关键词：蛇毒HUVEC细胞活性
- 病理生理学双语教学的尝试与思考被引量：2
- 2017年
- 目的通过实施病理生理学双语教学并总结教学经验,为医学人才的培养提升质量。方法选取150名2015年级在校学习的5年制临床医学专业学生,实施《病理生理学》双语教学授课,教学实施后通过问卷调查了解学生对双语教学的反映。结果结果显示,大多数学生赞成双语教学并表示这种新的教学模式对他们的理论知识及英语学习都有促进作用。结论《病理生理学》双语教学是适合5年制临床医学专业学生的,但在教学大纲、教学质控体系及师生语言能力环节仍需改进。
- 周淑艳李曙张翠张根葆
- 关键词：病理生理学双语教学
- AHV-PI抗血小板聚集的PI3K/Akt信号通路机制研究
- 2017年
- 目的 探讨蝮蛇毒血小板抑制因子（AHV-PI）抗血小板聚集的细胞内信号转导通路及其可能机制。方法 通过蛋白质免疫印迹（Western blot）检测AHV-PI对血小板内Akt蛋白激酶磷酸化水平情况,XS-1000I五分类血球计数仪进行血小板计数;酶联免疫吸附法（ELISA）测定家兔血浆中5’-核苷酸酶（5’-NT）,血小板膜糖蛋白Ib（GPIb）含量;流式细胞术（FCM）观察AHV-PI对荧光标记的单克隆抗体CD61（FITC-CD61）与血小板膜糖蛋白IIb/IIIa（GPIIb/IIIa）结合率的影响。结果 AHV-PI能降低Akt磷酸化水平,减少血小板数量,升高血浆中5’-NT含量,降低血小板GPIb的表达;AHV-PI对单克隆抗体CD61与血小板的结合率没有影响。结论 AHV-PI可以通过抑制蛋白激酶Akt磷酸化来阻断Akt通路的信号转导,限制细胞生长,减少血小板数量;具有5’-核苷酸酶的活性,能够降解ADP,防止血小板性血栓的形成。
- 季娜张根葆周淑艳
- 关键词：蝮蛇毒抗血小板聚集蛋白激酶
- 抑制LSD1对hiPSCs向定型内胚层分化的调控作用
- 2018年
- 目的:探讨抑制组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)对人诱导性多能干细胞(hiPSCs)向定型内胚层(DE)分化的调控作用。方法:利用LSD1抑制剂或shRNA抑制LSD1表达,观察hiPSCs形态变化并检测LSD1活性水平,CCK-8方法检测细胞增殖活性,qPCR检测hiPSCs多能性基因及各胚层标志基因的表达,IP-WB方法检测LSD1调控靶基因的复合体模式,Ch IP-qPCR方法检测DE标志基因启动子区域组蛋白H3第4位赖氨酸二甲基化和三甲基化(H3K4me2/me3)及第9位赖氨酸乙酰化(H3K9ac)水平。结果:(1)抑制LSD1可显著下调hiPSCs多能性基因OCT4、Y染色体性别决定区域盒2(SOX2)及Nanog同源盒(NANOG)的表达水平(P <0. 05);显著上调外胚层标志基因β3-微管蛋白(TUBB3),DE标志基因Y染色体性别决定区域盒17(SOX17)和叉头盒A2(FOXA2),以及中胚层标志基因骨形态发生蛋白2(BMP2)的表达水平(P <0. 05);(2)当LSD1活性为正常水平的53. 4%时利于DE分化;(3) LSD1在hiPSCs核内与组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)及阻遏物元件1沉默转录因子辅阻遏物(CoREST)以复合体的形式调控靶基因;(4)抑制LSD1后,SOX17和FOXA2基因启动子区域LSD1与HDAC1结合水平均显著下降,同时H3K4me2/me3和H3K9ac富集水平显著提高(P <0. 01)。结论:LSD1通过调控DE分化关键基因启动子区域H3K4me和H3K9ac水平来影响hiPSCs向DE的分化能力。
- 周淑艳周淑艳李富荣闫红杰李阳杨晓菲
- 关键词：RNA干扰分化
- 尖吻蝮蛇毒PCA对血管内皮细胞的影响
- 目的:观察皖南尖吻蝮蛇毒蛋白C 激活剂(PCA)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)活性及表达组织因子(TF)、血管性血友病因子(vWF)的影响,探讨PCA对血栓性疾病的防治机制.方法:常规培养HUVEC,MTT法检测细...
- 桑金凤周淑艳季娜张根葆
- AAVC-1诱导A549细胞凋亡的线粒体机制研究被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨皖南五步蛇蛇毒抑瘤组分Ⅰ(AAVC-1)诱导人非小细胞型肺癌A549细胞凋亡的作用,并分析其可能的线粒体机制。方法:以不同作用浓度的AAVC-1处理A549细胞,采用Annexin V/PI双染流式细胞仪分析法检测A549细胞凋亡百分率;JC-1检测细胞线粒体的膜电位变化,免疫组化检测细胞色素C在线粒体内的分布。结果:不同浓度梯度AAVC-1 1.0、3.0、9.0、20.0μg/m L处理24 h后,与对照组相比,A549细胞早期凋亡率明显增加(P<0.05);线粒体膜电位绿色荧光百分比由(23.01±6.07)%上升至(87.26±9.54)%(P<0.01),荧光显微镜观察到绿色荧光增强;免疫组化显示,随着AAVC-1浓度增加,胞质内细胞色素C平均光密度值明显增加(P<0.05)。结论:AAVC-1可以通过降低线粒体膜电位和促进细胞色素C的释放,激活线粒体通路诱导人非小细胞型肺癌A549的凋亡。
- 徐成张根葆周淑艳桑金凤
- 关键词：非小细胞型肺癌线粒体细胞凋亡
